一、胰岛素样生长因子系统在人早孕蜕膜基质细胞中的基因表达（论文文献综述）
贾青青[1]（2021）在《FOXO1、VCAM-1在早期妊娠丢失患者绒毛组织中表达的探究》文中研究指明目的:检测FOXO1、VCAM-1在正常早孕以及早期妊娠丢失患者绒毛中的表达情况,进而探讨两者在早期妊娠丢失发生发展过程中的关联。方法:1.选取2020年8月1日-2021年1月30日期间于山西医科大学第二医院门诊行人工流产术患者的绒毛组织,共50例,早期妊娠丢失组25例（实验组）;正常早孕组25例（对照组）。2.采用免疫组化法分别检测FOXO1、VCAM-1在早期妊娠丢失组及正常早孕组患者绒毛组织中的表达情况;采用qPCR法分别检测上述组织中FOXO1、VCAM-1mRNA的含量。3.统计学方法用SPSS26.0软件进行,对试验所得数据,全部先检验其方差齐性和正态性,如果不符合正态分布时,需将资料对数转换后,再进行分析;病例组及对照组,两组间同一指标比较用独立样本t检验,各指标在同一组的相关性用Pearson相关分析,认为有统计学意义需要P<0.05。结果:1.早期妊娠丢失组（实验组）及正常早孕组（对照组）所有患者的一般情况（年龄、孕龄、血压等）,比较后发现P>0.05,表示两组间差异无明显统计学意义。2.免疫组化结果早期妊娠丢失组中FOXO1和VCAM-1得分（分别为2.67±1.39、2.73±1.12）低于正常早孕组中FOXO1和VCAM-1得分（分别为4.37±1.13、4.73±1.23）;两组间FOXO1和VCAM-1得分间的差异经检验后,均有统计学意义（p<0.05）。3.qPCR结果FOXO1、VCAM-1在早期妊娠丢失患者绒毛中的表达量（分别为0.77±1.46、0.43±0.17）低于正常早孕组的表达量（分别为1.61±0.38、1.23±0.36）。所得结果用SPSS26.0分析病例组及对照组各指标间差异性及相关性,用独立样本t检验发现两组间FOXO1及VCAM-1的表达差异较大,有统计学意义（P<0.05）;用Pearson相关性分析,发现两指标之间具有相关性,且呈正相关,有统计学意义（P<0.05）。结论:1.两组患者的绒毛组织中均有FOXO1及VCAM-1的表达;2.早期妊娠丢失患者绒毛中FOXO1及VCAM-1蛋白表达及mRNA含量均低于正常早孕组;3.早期妊娠丢失患者绒毛中FOXO1及VCAM-1具有相关性（正相关）,提示两者可能参与了早期妊娠丢失发生发展过程,但分子机制目前尚不清楚,为临床早期妊娠丢失发病机制的研究提供了新思路。
于海帆[2]（2021）在《YAP/TAZ在小鼠子宫蜕膜化过程中的作用及调节机制》文中认为蜕膜化是子宫基质细胞增殖并分化为蜕膜细胞的过程,是子宫对正在发生着床的胚胎的响应,也是胚胎发育和成功妊娠的关键过程。蜕膜化缺陷可能导致一系列妊娠疾病,包括反复自然流产和早期妊娠失败。尽管许多转录因子、细胞因子和信号通路已被证实参与胚胎着床和蜕膜化过程,但其潜在的调控机制目前尚不完全清楚。大量研究表明,Yes-相关蛋白（YAP）和具有PDZ结合基序的转录共激活因子（TAZ）参与调控器官大小、干细胞功能、器官再生和肿瘤发展等过程。基因敲除鼠相关研究已证实,YAP/TAZ在哺乳动物胚胎发育过程中发挥重要作用。YAP缺失的胚胎具有致死性,而TAZ缺失的小鼠能够存活,但表现出肾脏发育缺陷。然而,关于YAP/TAZ在子宫蜕膜化过程中的作用及调控机制的研究很少。本课题旨在研究YAP/TAZ在小鼠子宫蜕膜化过程中的作用及调节机理,为进一步明确哺乳动物胚胎着床及蜕膜化的机制提供依据。在本研究中我们观察到,在小鼠子宫蜕膜化过程中YAP的表达量逐渐升高,并且证实YAP失活会影响子宫基质细胞的增殖和分化,并伴有细胞周期的阻滞。在子宫基质细胞中,Bmp2可通过Bmp I型受体Alk2促进YAP的表达并诱导YAP的核积累,从而增强细胞核内YAP-TEAD转录活性。通过si RNA或添加抑制剂导致YAP失活后可阻碍Bmp2对基质细胞分化的促进作用。使用荧光素酶报告基因分析发现,迁移到细胞核中的YAP可直接结合到Rrm2启动子区域的TEAD序列,并调节Rrm2在基质细胞中的功能。通过检测8-OHd G含量发现,过表达Rrm2可改善YAP失活引起的基质细胞DNA损伤,同时恢复基质细胞分化。进一步分析发现,YAP介导Bmp2对Rrm2表达的调控,而添加Rrm2抑制剂Triapine处理会阻碍Bmp2对基质细胞分化的诱导作用。YAP抑制后显着下调了GR和GPX的活性,进一步导致GSH含量下降,但上述指标在Rrm2过表达组呈现出相反的趋势。通过检测基质细胞内ROS含量、ATP水平、线粒体DNA拷贝数、线粒体膜电位以及线粒体膜通透性转运孔的开放程度,我们发现YAP失活会引起基质细胞发生氧化应激,并进一步导致线粒体功能发生紊乱。同时,YAP的失活通过促进Caspase-3和Bax的表达并抑制Bcl-2的表达从而诱发基质细胞凋亡。然而,GSH可有效的清除升高的ROS水平,并防止YAP失活引起的氧化应激、线粒体功能发生紊乱和细胞凋亡。本研究结果表明,TAZ定位于蜕膜组织中,能够通过靶向Ccnd3和Cdk4以加速细胞周期G1/S的过渡从而促进基质细胞的增殖,同时TAZ可促进基质细胞分化的标志分子Prl8a2和Prl3c1的表达,提高ALP的活性,表明TAZ对蜕膜化的发生至关重要。沉默TAZ会阻碍HB-EGF诱导的基质细胞的增殖和分化。在氧化应激状态下,TAZ通过减少细胞内ROS水平,并通过依赖于Nrf2/ARE/Foxo1的信号通路来增强基质细胞的抗氧化能力,进而保护基质细胞分化免受氧化损伤。TAZ能够增强Nrf2的转录活性,而Nrf2可直接与Foxo1启动子区域的抗氧化反应元件（ARE）结合。此外,TAZ沉默后可导致NOX活性升高从而引起细胞内ROS的积累,而一旦NOX的活性被APO抑制后,基质细胞分化所受的损伤可明显获得挽救。进一步研究表明,ATP水平升高、mt DNA拷贝数增加、线粒体膜电位升高和线粒体超氧化物水平下降共同提示,TAZ可明显恢复基质细胞的线粒体功能。同时,TAZ能够调节线粒体呼吸链复合物I和III的活性,而通过ROT和AA分别抑制其活性后,均可导致TAZ对基质细胞分化的保护作用丧失。另外,在氧化应激过程中,TAZ还可通过上调Bcl-2的表达并抑制Caspase-3的活性及Bax的表达来防止基质细胞发生凋亡。综上所述,本研究表明,YAP/TAZ在小鼠蜕膜化过程中发挥重要作用。我们的结果证实YAP可作为Bmp2的下游调控蛋白,通过TEAD/Rrm2/GSH/ROS信号通路调节子宫蜕膜化过程。TAZ可能通过靶向Ccnd3介导HB-EGF在子宫蜕膜化中的作用,并通过Nrf2/ARE/Foxo1信号通路减轻氧化应激介导的基质细胞分化损伤。
白清丽[3]（2021）在《AKT/mTOR/STAT3信号通路在稽留流产中的作用及机制研究》文中进行了进一步梳理目的:通过检测病例组和对照组胚胎组织中AKT/mTOR/STAT3信号通路相关因子和滋养细胞侵袭能力相关因子MMPs与TIMPs的基因和蛋白表达水平,研究此信号通路与稽留流产的关系及其可能的作用机制。方法:在兰州市妇幼保健院和平凉市静宁县妇幼保健院收集2018年05月至2019年04月期间,确诊的稽留流产患者和同时期进行人工流产终止妊娠的正常早孕者的血清及胚胎组织建立标本库。本研究选取12名稽留流产者为病例组,12名人工流产者为对照组,两组研究者孕周相同、年龄相近,无其他疾病及不良嗜好。对两组胚胎组织进行研究分析:（1）光镜下观察12对研究对象绒毛组织的病理组织学的变化;（2）采用q RT-PCR检测AKT/mTOR/STAT3信号通路相关因子基因的相对表达水平以及滋养细胞侵袭能力相关因子基因的相对表达水平;（3）采用Wes全自动蛋白质表达定量分析系统检测两组绒毛组织中AKT/mTOR/STAT3信号通路中相关因子蛋白的表达水平以及滋养细胞侵袭能力相关因子蛋白的表达水平;（4）采用免疫组织化学法观察p-STAT3在绒毛及蜕膜组织中的分布并进行定量分析。结果:（1）组织病理观察:病例组绒毛组织结构明显紊乱,滋养层明显变薄变浅,绒毛管腔变细、极度狭窄甚至消失,细胞数量明显减少,绒毛间质不清晰。（2）AKT/mTOR/STAT3信号通路相关因子表达:病例组绒毛组织中AKT、mTOR和STAT3 m RNA表达水平与对照组比较均降低（P<0.05）;病例组绒毛组织中p-AKT、mTOR、p-mTOR、STAT3和p-STAT3蛋白表达水平与对照组比较均降低（P<0.05）,p-AKT/AKT、p-mTOR/mTOR和p-STAT3/STAT3比值也均较对照组减小（P<0.05）。（3）p-STAT3定位及定量:在两组绒毛组织中的合体滋养细胞和细胞滋养细胞及蜕膜组织中均有不同程度地p-STAT3的阳性表达,其主要表达于细胞核中;p-STAT3蛋白在病例组的表达低于对照组（P<0.05）。（4）滋养细胞侵袭能力相关因子表达:病例组绒毛组织中MMP2和MMP9 m RNA的表达水平与对照组相比均降低（P<0.05）,TIMP2 m RNA表达水平与对照组相比则升高（P<0.05）;病例组绒毛组织中MMP2和MMP9蛋白表达水平与对照组相比均降低（P<0.05）,TIMP2蛋白表达水平较对照组升高（P<0.05）,MMP2/TIMP2和MMP9/TIMP3比值与对照组比较均减小（P<0.05）。结论:稽留流产绒毛膜组织中AKT/mTOR/STAT3信号通路表达下调,其下游转录因子MMP2/TIMP2和MMP9/TIMP3失衡,可能导致滋养细胞的侵袭能力降低,妊娠早期胚胎植入过浅,滋养细胞功能异常,影响胚胎的正常生长发育。AKT/mTOR/STAT3信号通路表达下调可能是稽留流产发生的重要机制之一。
张元媚[4]（2021）在《PAD4在胚胎着床与蜕膜化过程中的表达与调节》文中进行了进一步梳理目的子宫内膜容受性的破坏是子宫内膜异位症引起不孕的主要原因,也是限制辅助生殖技术成功的重要因素。肽基精氨酸脱亚胺酶4（peptidyl arginine deiminase4,PAD4）在胚胎发育、免疫、炎症、肿瘤发生等过程发挥多种生物学功能。PAD4在胚胎着床和蜕膜化过程中的作用至今未有研究报道,探究PAD4在人和小鼠子宫内膜组织中的表达以及其在子宫内膜接受态和蜕膜化中的作用,将为辅助生殖技术提供理论依据。方法本课题主要建立CD1小鼠早孕模型、假妊娠模型、类固醇激素处理模型和体外诱导基质细胞蜕膜化模型以及应用人的子宫内膜模型,通过检测PAD4蛋白和PAD4 mRNA在人和小鼠子宫内膜中的表达,进而探讨PAD4在胚胎着床及蜕膜化过程中的表达。结果应用免疫荧光检测PAD4蛋白在人子宫内膜基质细胞蜕膜化模型中的表达。PAD4蛋白在蜕膜化细胞的胞质和胞核都有表达,随着蜕膜化的进行,PAD4蛋白在0h、48h、96h的胞质中表达量增加,在144h胞质的表达量减少;PAD4蛋白随着蜕膜化的进行,在胞核的表达量减少。应用免疫组化检测PAD4在人正常和内异症子宫内膜组织中的表达,可见PAD4蛋白在正常子宫内膜组织分泌中期上皮表达较强,在内异症的上皮表达较弱。在正常子宫组织分泌中期及内异症基质细胞表达较强;在正常内膜组织晚期基质细胞表达较弱。在siRNA敲低实验中,PAD4敲低之后,可见PAD4 mRNA的表达量减低,在蜕膜化处理后,IGFBP1 mRNA和PRL mRNA的表达量增加。与正常蜕膜化组相比较,PAD4敲低组PRL mRNA表达量明显降低。在内异症组子宫内膜PAD4敲低之后,可见内异症子宫内膜PAD4 mRNA的表达量减低。在蜕膜化处理后内异症组子宫内膜IGFBP1 mRNA和PRL mRNA的表达量增加,与正常组相比较,内异症子宫内膜PAD4敲低组PRL mRNA和IGFBP1 mRNA表达量明显降低。使用Real-time PCR技术方法,检测小鼠早期妊娠模型中PAD4 mRNA的表达。PAD4 mRNA从妊娠第0.5天（D0.5）到妊娠第1.5天（D4.5）呈现上升的趋势,D2.5胚胎着床以后,PAD4 mRNA的表达随妊娠进展逐渐下降。在D4.5和D5.5天,与着床位点相比,非着床位点表达量下降。为研究PAD4的表达是否与胚胎的存在有关,故采用了假孕模型检测小鼠子宫中PAD4 mRNA的表达。从PD0.5天到PD5.5天,随着妊娠进展,PAD4 mRNA的表达下降。采用雌孕激素调节模型来检测雌孕激素调节对于小鼠子宫组织PAD4 mRNA表达的影响。Real-time PCR显示,P4处理小鼠6h后PAD4 mRNA的表达较未用P4处理组下降;单独E2处理卵巢切除小鼠6h后PAD4 mRNA表达明显降低;雌激素联合孕酮处理后表达量下降。通过雌孕激素联合抑制剂处理卵巢切除的雌鼠观察雌孕激素对PAD4 mRNA表达的调节。与对照组相比,在单独P4处理小鼠6h后PAD4mRNA的表达较对照组表达增强,在P4联合RU489处理卵巢切除小鼠6h后,PAD4 mRNA的表达下降。以皮下注射芝麻油6h为对照,在E2单独处理6h后PAD4 mRNA的表达较对照组下降;E2联合ICI处理6h后PAD4 mRNA的表达较未加ICI处理组下降。通过使用Real-time PCR检测技术检测PAD4 mRNA在使用雌孕激素诱导的小鼠基质细胞蜕膜化过程中的表达,PAD4 mRNA的表达在雌孕激素诱导的蜕膜化后的48h、72h、96h和120h表达升高,24h的细胞中表达下降。结论敲低PAD4基因可以降低PAD4在蜕膜化过程中的表达,表明PAD4参与了蜕膜化过程且对蜕膜化的影响具有剂量依赖性;敲低PAD4基因可以降低PAD4在内异症子宫内膜蜕膜化中的表达,表明PAD4参与了内异症的蜕膜化过程且对蜕膜化的影响具有剂量依赖性;雌、孕激素主要通过雌孕激素受体下调PAD4的表达;PAD4的存在与小鼠胚胎着床有关,且对小鼠子宫中的作用与胚胎的存在有关;PAD4参与了小鼠体外基质细胞蜕膜化过程。
白瑾[5]（2021）在《PI3K/AKT信号通路在IGF1诱导HTR-8/SVneo细胞分泌HCG和Pg的作用研究》文中研究指明目的:以HTR-8/SVneo细胞为模式细胞,检测胰岛素样生长因子1（IGF1）对PI3K/AKT信号通路相关蛋白的表达、细胞凋亡以及人绒毛膜促性腺激素（HCG）和孕酮（Pg）分泌水平的影响,探讨PI3K/AKT信号通路在IGF1诱导HTR-8/SVneo细胞分泌HCG和Pg中的作用。方法:培养HTR-8/SVneo细胞,分别给予IGF1以及LY294002（PI3K抑制剂）处理。（1）CCK-8法被用于检测IGF1与LY294002作用后对细胞活力的影响,再根据Wes全自动蛋白表达定量分析系统明确促进或抑制PI3K的最小剂量,从而确定作用剂量分组:对照组、IGF1处理组（10 ng/m L）、LY294002处理组（10?M）、LY294002+IGF1联合处理组（10?M LY294002预处理30 min后加入10 ng/m L IGF1）。（2）q RT-PCR被用来检测PI3K/AKT通路基因PI3K、AKT以及细胞凋亡相关因子基因Bad、Cyt c和Caspase-3的m RNA表达量;（3）采用Wes测定PI3K、p-PI3K、AKT与p-AKT四个信号通路蛋白以及Bad、p-Bad、Cyt c与Caspase-3四个凋亡相关蛋白的表达水平;（4）通过FITC/PI双染法测定细胞的总体凋亡水平。（5）通过ELISA来测定细胞上清HCG及Pg的合成分泌量。结果:（1）IGF1与LY294002对细胞存活率的作用:10、50、100和200 ng/m L IGF1作用于HTR-8/SVneo细胞24 h和48 h后,细胞存活率均显着增强（P<0.05）,50 ng/m L IGF1促进细胞存活作用最强;5、10、20、40?M LY294002进行染毒,24 h和48 h后,显示该细胞的活力明显下降（P<0.05）,且表现出对时间与剂量的依赖性。（2）PI3K/AKT通路激活状况:（1）m RNA表达:对比对照组,IGF1与LY294002分别单独处理后PI3K、AKT m RNA表达水平无显着差异;相较于LY294002处理,LY294002+IGF1联合处理后PI3K、AKT m RNA相对表达量明显升高（P<0.05）。（2）蛋白表达:各组PI3K与AKT的蛋白表达量无明显变化。经IGF1处理后,p-PI3K和p-AKT的蛋白表达量明显增高,p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT明显升高;LY294002降低了p-PI3K与p-AKT的表达量,p-PI3K/PI3K及p-AKT/AKT的比值也明显减低（P<0.05）;与LY294002处理组相比,LY294002+IGF1联合处理组p-PI3K、p-AKT、p-PI3K/PI3K以及p-AKT/AKT均明显增加。上述结果提示,IGF1明显激活了PI3K/AKT信号通路。（3）凋亡相关因子的表达:（1）m RNA表达:IGF1处理组Bad、Cyt c和Caspase-3 m RNA表达水平无显着变化,LY294002处理组Cyt c以及Caspase-3 m RNA的表达量明显增高（P<0.05）;LY294002+IGF1联合处理组较之于LY294002处理组Caspase-3 m RNA表达减少（P<0.05）。（2）蛋白表达:经IGF1处理后,Bad及Cyt c蛋白表达量不存在明显差异,p-Bad表达量显着增高,且p-Bad/Bad增大（P<0.05）;经LY294002处理后,Bad及Cyt c蛋白表达量均增加,p-Bad蛋白表达量与p-Bad/Bad比值均下降（P<0.05）;较之于LY294002处理组,LY294002+IGF1联合处理组Cyt c、Bad和p-Bad表达量以及p-Bad/Bad均升高（P<0.05）。pro-Caspase-3的蛋白表达在四组间未表现出显着差异。cleaved-Caspase-3蛋白表达在IGF1处理后略有降低趋势（P>0.05）,在LY294002处理后升高,LY294002+IGF1联合处理后对比LY294002处理其蛋白表达量明显降低（P<0.05）。以上结果表明,IGF1可通过促进抗凋亡因子和抑制部分促凋亡因子的蛋白表达而发挥抗凋亡作用。（4）细胞凋亡率:经IGF1处理后,较之对照组总凋亡率有降低趋势（P>0.05）,但经LY294002处理后,总凋亡率显着上升（P<0.05）;与LY294002处理组相比,联合处理组的总凋亡率降低（P<0.05）。结果提示,IGF1能够改善因PI3K抑制引发的细胞凋亡,而对正常细胞作用不明显。（5）HTR-8/SVneo细胞产生HCG和Pg的含量:10 ng/m L IGF1能够明显增加HCG的分泌水平,10?M LY294002抑制其分泌;与LY294002处理组相比,LY294002+IGF1联合处理组HCG分泌增加。与对照组相比,10 ng/m L IGF1促进Pg分泌,LY294002对Pg分泌未表现出抑制作用;与LY294002处理组相比,LY294002+IGF1联合处理组细胞Pg分泌量升高（P<0.05）。结论:IGF1通过明显活化PI3K/AKT信号通路,能够减少HTR-8/SVneo细胞的凋亡,促进了细胞的存活和增殖,进而促进HCG分泌。但IGF1促进Pg分泌则是通过调控其它信号通路实现的。
王雪吟[6]（2021）在《岩藻糖基转移酶Ⅳ（FUT4）促进子宫内膜蜕膜过程的作用及机制研究》文中认为目的:在哺乳动物生殖过程中,子宫内膜蜕膜化是胚胎植入子宫内膜过程中,引起子宫内膜间质的广泛重构的过程。子宫内膜蜕膜化对于胚胎植入是非常重要的过程。子宫内膜蜕膜化异常可引起许多妊娠相关疾病,如不孕症、复发性流产、胎儿宫内生长受限、子痫前期、子宫内膜异位症等。蛋白质糖基化是一种常见的蛋白质翻译后修饰方式,分为N-糖基化和O-糖基化。岩藻糖基化是一种重要的糖基化修饰方式,岩藻糖基化参与胚胎发育、肿瘤发生和免疫功能障碍等重要的生理及病理过程。岩藻糖基转移酶是催化岩藻糖基化的关键酶,分为N-盐藻糖基转移酶和O-岩藻糖基转移酶,催化岩藻糖基从核苷二磷酸岩藻糖转移到受体分子。N-岩藻糖基转移酶IV（fucosyltransferase 4,FUT4）催化岩藻糖（L-fucose）通过α-1,3糖苷键连接到H type 2[Fucα→1Galβ1→4Glc NAcβ1→R]抗原,生成LeY（Lewis antigen Y,LeY）[Fuc1→2Galβ1→4（Fuc1→3）Glc NAcβ1→R]。LeY是细胞表面Lewis寡糖,LeY在胚胎发育过程中呈阶段特异性表达,在着床窗口期胚胎表面高表达,参与胚胎植入过程。实验室前期研究表明,子宫内膜上皮细胞表面LeY介导胚胎和子宫内膜上皮的黏附作用,而在子宫基质细胞蜕膜化过程中的影响及机制研究还未见报道。方法:1.利用免疫组织化学实验检测FUT4/LeY/LTL在增生期、分泌期、正常早孕期及难免流产期的子宫内膜组织中的表达。2.体外诱导人子宫内膜基质细胞,利用Western blot、Real-time PCR及细胞免疫荧光实验检测蜕膜后蜕膜标志物、FUT4在基质细胞的表达。3.通过转染FUT4-si RNA和FUT4-c DNA调节h ESCs细胞中FUT4的表达,利用Western blot、Real-time PCR检测FUT4及蜕膜标志物的表达。4.通过转染FUT4-si RNA和FUT4-c DNA调节h ESCs细胞中FUT4的表达,利用Western blot、CCK8和细胞免疫荧光实验检测蜕膜后细胞增殖情况。5.通过pull down实验及质谱测定,筛选并确定LeY的靶蛋白CD47,通过免疫共沉淀实验检测蜕膜后,调控FUT4检测特定靶蛋白上LeY的变化,及其介导的信号通路的改变,对蜕膜过程的影响。结果:1.免疫组织化学检测人增生期、分泌期、孕早期及难免流产期组织中FUT4/LeY表达,结果显示:FUT4/LeY在增生期、分泌期、孕早期的表达依次增加,而在难免流产期的表达低于孕早期。2.体外诱导基质细胞蜕膜化后,细胞形态上体积变大,由梭形变成圆形,蜕膜标志物PRL和IGFBP-1表达增加,蜕膜后h ESCs细胞中FUT4表达增加。3.FUT4促进基质细胞蜕膜化。通过Western blot、Real-time PCR及细胞免疫荧光实验,结果显示:h ESCs细胞诱导蜕膜化同时,下调FUT4的表达,可以抑制蜕膜标志物PRL和IGFBP-1的表达。上调FUT4,促进PRL、IGFBP-1及FUT4的表达。4.FUT4通过激活细胞周期蛋白促进子宫内膜基质细胞的增殖能力。细胞免疫荧光结果显示,与对照组相比,在h ESCs细胞中转染FUT4-si RNA后,细胞增殖核抗原（PCNA）的表达降低;转染FUT4-c DNA后,PCNA的表达高于对照组。Western blot实验结果表明,与对照组相比,转染FUT4-si RNA,PCNA、CDK4和CDK6的表达降低;转染FUT4-c DNA,PCNA、CDK4和CDK6的表达增加。通过CCK-8实验结果发现,FUT4-si RNA抑制细胞增殖能力;FUT4-c DNA促进细胞增殖能力。5.FUT4通过上调LeY的表达激活PDK/AKT/GSK-3β信号通路从而促进子宫内膜蜕膜化。通过pull down实验的结果,并进行质谱分析。质谱结果筛选到,在正常早孕相比难免流产中有显着差异表达的蛋白有233个。进一步从GO功能中筛选出靶蛋白CD47。通过免疫共沉淀实验检测,与对照组相比,转染FUT4-si RNA,CD47上的LeY表达降低,p-PDK、p-AKT、和p-GSK-3β的信号通路受到抑制,抑制蜕膜;转染FUT4-c DNA,与对照组相比,CD47上的LeY表达增加,p-AKT、p-PDK和p-GSK-3β信号通路被激活,促进蜕膜。加入通路抑制剂LY294002后,蜕膜标志物PRL和IGFBP-1的表达降低。结论:1.与孕早期相比较,FUT4/LeY在难免流产患者组织中表达降低。2.FUT4增加CD47上LeY的合成,激活PDK/AKT/GSK-3β信号通路,促进子宫基质蜕膜化。
吴洋[7]（2021）在《多囊卵巢综合征对于围着床期子宫中免疫细胞及细胞外基质的影响》文中提出2018年“多囊卵巢综合征国际循证医学指南”中报道8%-13%的女性患有多囊卵巢综合征（Polycystic Ovary Syndrome,PCOS）,其中80%以上育龄期PCOS患者饱受不孕症的困扰。正常妊娠需要具备着床能力的胚胎与处于容受性的子宫内膜相互作用,两者缺一不可。即使PCOS患者通过辅助生殖技术移植了高质量的胚胎,子宫内膜的异常仍然会导致着床失败或不良的妊娠结局。目前,对于PCOS子宫内膜异常的研究相对不足,其导致着床失败的确切机制也仍未阐明。对于围着床期PCOS子宫内膜变化的机制研究,可以帮助我们寻找潜在的治疗靶点、进一步提升胚胎种植成功率并改善妊娠丢失。本课题从小鼠PCOS模型、脱氢表雄酮短期干预等小鼠处理,以及人PCOS内膜标本补充研究三个层次,对围着床期PCOS子宫内膜容受性的改变进行了分析探究。本论文利用脱氢表雄酮（Dehydroepiandrosterone,DHEA）处理小鼠建立PCOS模型,这些小鼠成功地表现出卵巢多囊样改变、高雄激素血症、体重增加、不孕等PCOS特征。对PCOS小鼠妊娠第4天的子宫进行转录组测序显示,差异2倍以上的基因中有610个上调,91个下调。生物信息学分析显示:在细胞组分和分子功能方面,差异基因富集最多的是细胞外基质和多种与之相关的功能,如细胞粘附分子、基膜、细胞桥粒、细胞顶端质膜、微绒毛等;生物过程的富集分析显示,免疫反应相关生物学过程占比最高,包括细菌免疫反应和防御反应等。为进一步明确DHEA对小鼠子宫细胞外基质和免疫细胞的影响,本研究使用DHEA对小鼠进行了不同的处理:妊娠第3天DHEA处理小鼠1天,妊娠第1-3天DHEA处理正常妊娠小鼠3天,同样的方法处理假孕小鼠3天,卵巢切除后给予小鼠21天DHEA处理。基于上述预测分析以及DHEA不同处理,我们对小鼠子宫中的免疫细胞数量及定位进行了详细研究。（1）与对照组相比,PCOS小鼠围着床期子宫中性粒细胞增多并向腔上皮附近聚集,差异极为显着;妊娠第1-3天给予DHEA处理后,子宫中性粒细胞数量显着增多,同时向宫腔附近聚集,假孕小鼠同样给予3天DHEA处理后,中性粒细胞数量增多,但定位没有变化。（2）围着床期PCOS小鼠子宫中巨噬细胞显着增多并在子宫腔附近聚集,DHEA处理3天对巨噬细胞的数量和分布影响不大,但长期DHEA暴露可以增加内膜中的巨噬细胞数量,并促使其向宫腔附近聚集,围着床期胚胎对子宫中巨噬细胞的影响不大。（3）妊娠第4天PCOS小鼠子宫内膜基质中树突状细胞减少,肌层中树突状细胞数量无明显变化;围着床期使用DHEA分别处理正常妊娠小鼠和假孕小鼠3天,正常妊娠小鼠子宫中树突状细胞无明显改变,假孕小鼠子宫基质中树突状细胞数量大幅增加;卵巢切除小鼠DHEA处理21天后树突状细胞在子宫基质和肌层中的数量均显着增加。（4）与对照组相比,PCOS小鼠围着床期子宫肌层中肥大细胞增多,DHEA处理对子宫中肥大细胞数量影响不大。（5）围着床期PCOS小鼠子宫中B细胞显着增多,并向宫腔上皮附近聚集;DHEA处理3天可促使B细胞增多并向宫腔上皮聚集,宫腔中胚胎对B细胞的分布影响不大。此外,我们详细分析了DHEA对围着床期子宫细胞间连接和细胞外基质的影响。（1）与对照组相比,PCOS小鼠围着床期子宫中埃兹蛋白（Ezrin）在子宫腔上皮和腺上皮中表达明显增加,围着床期DHEA处理1天或3天都可以显着增加Ezrin在小鼠子宫上皮中的表达,并且影响其分布模式,胚胎对子宫中Ezrin表达的影响不明显。在人胚胎种植窗口期,PCOS患者子宫内膜腔上皮和腺上皮Ezrin表达均强于对照组,差异显着。（2）PCOS小鼠围着床期子宫腔上皮和腺上皮中钙粘蛋白的表达显着增加;DHEA处理3天对正常妊娠小鼠子宫中钙粘蛋白的表达影响不大,但假孕小鼠DHEA处理3天后子宫腔上皮和腺上皮钙粘蛋白的表达均增强。在人胚胎种植窗口期,PCOS患者子宫内膜腔上皮钙黏蛋白的表达明显强于对照组,腺上皮钙黏蛋白的表达无明显差异。（3）与对照组相比,PCOS围着床期子宫肌层中层粘连蛋白的表达显着增加,腔上皮基膜、腺上皮基膜和血管基膜中层粘连蛋白的沉积变薄,由正常的锯齿状变为细线状;围着床期DHEA处理3天可改变上皮基膜和血管基膜中层粘连蛋白沉积的形态,但对其厚度影响不大,同时子宫肌层中层粘连蛋白的表达显着增强,胚胎对围着床期子宫中层粘连蛋白的改变无明显影响。（4）围着床期PCOS小鼠子宫基质中层粘连蛋白γ1的表达随基质中血管数目的减少而下降,DHEA处理3天显着降低腺上皮基膜层粘连蛋白γ1的表达。在人胚胎种植窗口期,PCOS患者子宫内膜腔上皮和腺上皮层粘连蛋白γ1的表达无明显差异。（5）与对照组相比,围着床期PCOS小鼠子宫中胶原蛋白IV在腔上皮基膜或腺上皮基膜中的沉积变薄,并且随着子宫基质中血管的减少,胶原蛋白IV的表达显着减少;DHEA处理3天可产生与PCOS相似的变化。（6）CD31主要表达于血管内皮细胞质中,妊娠第4天小鼠子宫中CD31表达较为密集,但PCOS小鼠子宫中表达减少,差异极为显着;PCOS小鼠子宫中CD31显示切面呈圆环状的血管,其密度明显下降,更多的是切面管腔呈狭长状的血管,数量也较少;围着床期DHEA处理3天后子宫中血管显着减少;胚胎可能对围着床期小鼠子宫中血管的数量有影响。（7）妊娠第4天PCOS小鼠子宫腔上皮中荆豆凝集素（Ulex Europaeus Agglutinin,UEA）受体的表达强于对照组,腺上皮中UEA受体的表达无显着差异;围着床期DHEA处理小鼠1天,子宫腔上皮UEA受体于宫腔游离面顶端及邻近的细胞质中呈强表达;DHEA处理3天腔上皮UEA受体表达减少呈不均匀分布;卵巢切除后,子宫腔上皮和腺上皮中未见UEA受体的表达;围着床期子宫腔中的胚胎可能会诱导子宫上皮中UEA受体的表达增加。总之,PCOS小鼠与对照组小鼠妊娠第4天的子宫在m RNA层面存在显着差异,主要变化集中在免疫反应和细胞外基质等方面;DHEA对围着床期子宫中免疫细胞的数量和分布有较大影响,如中性粒细胞、巨噬细胞、树突状细胞、B细胞和肥大细胞等,这可能对其发挥正常的免疫作用有不良影响;细胞外基质是细胞通讯和细胞骨架的重要组分,DHEA对埃兹蛋白和钙黏蛋白的表达量都有较大改变,可能影响细胞的正常粘附和极性;DHEA对层粘连蛋白及其亚型、胶原蛋白IV以及CD31的影响,可能导致胚胎着床中细胞骨架的重构及细胞间沟通的异常。
刘玲[8]（2020）在《富血小板血浆（Platelet-rich Plasma，PRP）对RL95-2细胞增殖及对子宫内膜容受性的影响》文中研究表明背景女性排卵后5至7天是胚胎着床的最佳时期,即“着床窗”。胚胎是否能够成功的着床,关键在于子宫内膜对胚胎的接受能力,即子宫内膜的容受性。子宫内膜的厚度则是决定其容受性的重要前提,大量实验结果表明,患者接受体外受精与胚胎移植治疗过程中,如果新鲜胚胎移植时子宫内膜厚度小于或者等于7mm时,其临床妊娠率较内膜厚度大于7mm患者组的临床妊娠率显着降低,并且妊娠早期流产率升高,而患者接受冷冻胚胎复苏移植的过程中,子宫内膜厚度小于8mm的患者,其临床妊娠率明显低于子宫内膜大于或者等于8mm组的患者组,且其妊娠早期流产率较对照组相比,显着升高[1]。上述实验结果表明,子宫内膜的厚度很大程度上影响了子宫内膜对胚胎的容受性,决定了胚胎着床是否能够成功。在辅助生殖技术治疗中,有些女性因为各种病因造成子宫内膜过薄,导致体外受精胚胎移植失败,或者是子宫内膜厚度虽然已经满足胚胎移植需要的内膜厚度,但是多次移植胚胎未获得成功妊娠。影响子宫内膜容受性的病因十分复杂,患者既往反复刮宫、流产、子宫内膜结核、急性或者慢性的子宫内膜炎等均可能导致子宫内膜发生病理改变,致使子宫内膜变薄弱,另外环境因素影响、患者年龄因素及内分泌异常也可以导致子宫内膜过薄。我们将这种顽固的内膜厚度在黄体中期仍小于7mm的患者称为薄型子宫内膜患者。目前有很多治疗内膜过薄的方法,但是这些手段都缺乏针对性,不同的患者对同一个治疗手段表现的治疗效果不确切。近年来反复着床失败患者在生殖领域越来越受到关注,我们将年龄小于40岁,累计移植至少2枚囊胚或者4枚卵裂期胚胎仍未获得临床妊娠的患者,视为反复着床失败患者,其导致着床失败的主要原因概括起来分为两个方面,即子宫内膜容受性因素和胚胎因素,除患者胚胎质量差,非整倍体率显着升高,胚胎发育潜能低等胚胎自身发育异常的因素外,宫腔内环境异常导致子宫内膜容受性降低是其中另一个重要的因素。因此,在患者接受辅助生殖技术治疗过程中,在胚胎已经获得不能改变其质量的前提下,如何增强子宫内膜的容受性是反复着床失败患者改善临床妊娠率的关键问题。自体富血小板血浆（autologous Platelet-rich Plasma,PRP）主要通过两步离心处理的方式获得,是正常外周静脉血中血小板浓度的4-7倍,属于血小板高度浓缩之后的产物,血小板的生理功能在于其激活后参与凝血过程,血小板经过不同的途径激活后,会瞬间粘附聚集,并主动地释放各种生长因子,其中最主要的生长因子有:转化生长因子（transforming growth factor,TGF）、胰岛素样生长因子（insulin-like growth factor,IGF）和表皮生长因子（epidermal growth factor,EGF）等[2-3]。他们在参与组织的修复包括内皮细胞的趋化、血管生成,以及促炎性细胞浸润等方面起到了诱导作用。由于PRP的抗炎、诱导内皮细胞趋化及促进血管形成的生理作用,PRP已经被应用于促进骨组织及慢性伤口愈合的治疗中[4],由于PRP取材于自体血,避免了交叉感染的风险,使用相对安全。根据PRP的生理学特性,我们设想,是否能将PRP促细胞增殖及修复的作用应用至女性子宫内膜的修复的领域中,改善临床中因子宫内膜容受性异常而导致患者胚胎移植失败的患者的子宫内环境,提高其临床妊娠率。目前临床上PRP在生殖领域的应用偶有报道［5-7],但是大多是个案报道,缺乏大样本的研究,PRP的制作及浓度标准不一,且缺乏对PRP对子宫内膜容受性影响的基础研究。目的本研究评估PRP对体外培养RL95-2细胞增殖的影响,观察PRP在体外促进细胞增殖的最佳浓度,探讨PRP 3D培养RL95-2细胞的可行性,观察PRP是否可以增加RL95-2细胞在通过静电纺丝技术制成的3D细胞生长支架上的粘附作用。并通过对薄型子宫内膜模型SD大鼠宫腔灌注PRP,观察PRP是否能够改变大鼠子宫内膜厚度及容受性,修复经无水乙醇化学性损伤后的大鼠子宫内膜功能层。并将自体PRP宫腔灌注到反复着床失败及薄型子宫内膜患者宫腔里,观察反复着床失败患者及薄型子宫内膜患者通过PRP宫腔灌注治疗后行冷冻胚胎复苏移植后的临床妊娠率、胚胎流产率及胚胎着床率的改变,探讨PRP在治疗薄型子宫内膜,提高反复着床失败患者子宫内膜容受性,改善临床妊娠率可行性。方法取5名健康志愿者空腹静脉血17.5毫升,添加2.5毫升抗凝剂,采用两步离心法分离获得PRP,向PRP中添加10%CaCl2及凝血酶冻干粉缓冲液混合使之活化。将活化后的PRP加入RL95-2细胞培养液中,根据PRP及培养液中胎牛血清的不同浓度进行分组,MTT法测量不同浓度PRP及胎牛血清组RL95-2细胞的增殖曲线。将制备的PRP放入96孔板中,根据其是否激活分为AB两组,测用ELISA方法测量两组PRP在体外不同时间段释放的生长因子VEGF、TNF-β、IGF、EGF、PDGF的浓度,动态观察两组PRP在不同时间段分泌生长因子的浓度变化。将PRP与3D培养的RL95-2细胞共培养7天,行石蜡包埋切片后HE染色,观察PRP是否可以促进3D培养支架中RL95-2细胞的活性,将激活后的PRP作为3D支架,将RL95-2作为种子细胞种植在PRP上,观察细胞在PRP支架上的存活情况。对3D培养的细胞进行免疫组织化学染色,观察RL95-2细胞在3D培养条件下是否能够正常表达孕激素受体。通过无水乙醇宫腔灌注对大鼠子宫内膜造成化学性损伤,获得大鼠薄型子宫内膜动物模型,造模成功后对治疗组大鼠行PRP宫腔灌注,通过HE染色的方法观察PRP宫腔灌注后对大鼠子宫内膜的修复作用,通过对大鼠子宫内膜波形蛋白、血管内皮生长因子及整合素的观察证实PRP宫腔灌注后是否可以改善大鼠子宫内膜容受性。反复着床失败治疗组患者及薄型子宫内膜患者于冻胚复苏周期行PRP宫腔灌注2-3次,薄型子宫内膜患者在月经干净3-5天行宫腔镜检查,同微型剪分别在子宫前后壁及侧壁行微刺激,观察治疗组患者PRP宫腔灌注前后子宫内膜厚度的改变,当内膜厚度达到移植标准之后,再进行冷冻胚胎复苏移植,对治疗组患者的相关实验数据进行统计,具体包括患者的临床妊娠率、流产率及胎儿出生情况。结果（1）PRP与RL95-2细胞共培养,可促进RL95-2细胞的增殖,RL95-2细胞生长曲线表明在PRP浓度1%联合血清浓度2%及10%的培养液中增殖速度最快,且培养72小时后细胞增殖明显。在无血清培养液中PRP共培养的RL95-2细胞增殖活性明显增高,低浓度（1%及2%）PRP对RL95-2细胞的增殖活性优于高浓度（5%及10%）PRP。（2）PRP体外无论是否激活均可以持续分泌VEGF、TNF-β、PDGF、EGF等生长因子,生长因子浓度随天数增加而持续增加。（3）PRP可以促进RL95-2细胞在3D细胞培养支架中中细胞的粘附;以PRP为3D支架,培养RL95-2细胞,石蜡包埋切片后,可见支架表面RL95-2生长,但因支架空隙小,内部无细胞生长。（4）大鼠宫腔灌注PRP可以增加大鼠薄型子宫内膜厚度,并且PRP宫腔灌注组波形蛋白、整合素β3、血管内皮生长因子的蛋白水平高于薄型子宫内膜组。（5）通过对反复着床失败患者PRP宫腔灌注,其临床妊娠率与正常对照组无显着性差异。通过PRP宫腔灌注薄型子宫内膜患者宫腔,可以使患者子宫内膜厚度增加,降低了冷冻胚胎复苏移植周期取消率。结论（1）PRP体外培养可以促进RL95-2细胞的增殖,低浓度PRP联合低浓度胎牛血清促进RL95-2细胞增殖活性高于培养液单纯添加血清组。（2）PRP可以促进RL95-2细胞在3D支架上的粘附及增殖,且具有制备3D细胞培养模型的方法还需因一步改善,为宫腔内移植子宫内膜上皮细胞或者干细胞提供可能的载体选择。（3）PRP宫腔灌注大鼠宫腔,可以修复子宫内膜受到无水乙醇的化学性破坏的大鼠的宫腔,改善大鼠薄型子宫内膜的容受性。（4）反复着床失败的患者组经PRP宫腔灌注后获得了同对照组相似的临床妊娠率,流产率及胎儿出生率。PRP可以有效的改善反复着床失败患者的子宫内膜容受性。PRP宫腔灌注至薄型子宫内膜患者宫腔,治疗组患者子宫内膜厚度增加,降低了冻胚复苏周期取消率,且获得了临床妊娠,并未增加子代出生畸形的机率及产科并发症的风险。
安君霞[9]（2020）在《促性腺激素释放激素激动剂在冻融胚胎移植周期中的临床疗效和作用机制研究》文中进行了进一步梳理背景:中国人口协会发布的调查显示,我国患不孕不育症的夫妻人数在急剧增加。不孕不育患者由于受家庭和社会舆论的双重压力而普遍存在多种心理问题,严重影响家庭和社会和谐。近年来,辅助生殖技术为不孕夫妇带来了福音,冻融胚胎移植周期（FET）因能减少并发症、提高累积妊娠率等优点越来越受青睐。在胚胎予以冷冻保存并无法控制质量的情况下,子宫内膜条件的好坏直接关系着FET周期的成功与否。促性腺激素释放激素激动剂（gonadotrophin releasing hormone agonist,Gn RH-a）因可抑制垂体功能使异位子宫内膜处于休眠状态,是治疗子宫内膜异位症药物的首选。近年来,Gn RH-a也被逐渐应用于FET周期。目前常用的内膜准备方法有激素治疗法（hormone therapy cycle,HT）及降调节激素治疗法（HT with gonadotropin-releasing hormone agonist,HT+Gn RH-a）。但由于缺乏以分子机制为基础的研究,对于哪种方法最优一直存在争议。目的:本文拟以临床和基础研究相结合的方式研究Gn RH-a在FET周期中的临床疗效和作用机制,以探寻FET周期最佳内膜准备方案。方法:回顾性研究近年于我院行FET周期的患者,按照内膜准备方案分为六组,HT组338例为单纯雌孕激素替代周期（HT）,HT+1 Gn RH-a组323例、HT+2 Gn RH-a组329例、HT+3 Gn RH-a组323例、HT+4 Gn RH-a组316例、HT+5Gn RH-a组313例分别为经1、2、3、4、5周期Gn RH-a垂体降调节后激素替代治疗的周期,收集并统计分析各组临床妊娠结局及胚胎移植日子宫内膜下血流参数,同时收集黄体期或胚胎移植日子宫内膜组织以评估内膜容受性。最后利用体外细胞模型研究Gn RH-a预处理对人内膜细胞增殖、容受性及蜕膜化的影响及机制。结果:1.HT+3 Gn RH-a组有更优的临床妊娠结局和内膜容受性。主要表现在同一治疗周期:1)有更高的胚胎种植率、临床妊娠率和活产率;2)胚胎移植日内膜下血流灌注更佳;3)移植日内膜组织中容受性标志分子如LIF、整合素β3、OPN、Hoxa10等表达量更高;4)治疗后移植日内膜组织和血清中抑制内膜容受性的mi RNA如mi R-125b-5p、mi R-223-3p、mi R-27a-3p表达量更低。2.Gn RH-a虽能通过线粒体途径诱导内膜细胞凋亡,但当联合雌、孕激素处理后对内膜细胞增殖的影响不显着。3.Gn RH-a预处理能促进内膜细胞尤其腺上皮细胞中容受性标志分子如LIF、整合素β3、OPN、VEGF、Hoxa10等表达量。4.Gn RH-a能以时间依赖的方式促进人子宫内膜基质细胞蜕膜化,且是ERK1/2依赖的。结论:研究结果表明FET周期中3周期Gn RH-a降调节的内膜准备方式在改善临床妊娠结局和提高内膜容受性方面效果最佳。本文为进一步提高FET周期临床妊娠率和活产率奠定良好基础,为在FET周期中选择内膜准备方式提供参考。
钟惠[10]（2020）在《Kisspeptin协同孕酮通过Notch1信号通路调控子宫内膜蜕膜化的研究》文中研究说明目的:比较不明原因复发性流产和正常早孕女性蜕膜组织Notch1信号通路相关靶基因,研究kisspeptin和靶基因之间的关系,为kisspeptin协同孕酮通过Notch1信号通路介导子宫内膜蜕膜化的假说提供依据。方法:1、收集2019年3月—2019年12月于苏州大学第二附属医院生殖门诊就诊的 11个不明原因复发性流产（unexplained recurrent spontaneous abortion,URSA）和 10个正常早孕女性的蜕膜组织,mRNA array 比较两者间Notch1信号通路相关靶基因表达差异。2、基于 mRNA array 结果筛选出 Notch1、Jag2、Hes5,收集 2019 年 3 月—2019年12月于苏州大学第二附属医院生殖门诊就诊的19个URSA和12个正常早孕女性的蜕膜组织,采用免疫组化及Western-blot方法检测kisspeptin,Notch1、Jag2、Hes5在两组间的蛋白水平表达。3、细胞实验:（1）人类子宫内膜基质细胞（Human endometrial stromal cells,hESCs）,E2、MAP及8-Br-cAMP联合诱导细胞蜕膜化,观察细胞形态学改变,以及随时间变化Notch1、Jag2、Hes5基因以及蛋白水平表达;（2）细胞分组,Control组:正常蜕膜化;Kisspeptin组:加入kisspeptin干预;siRNA组:转染Kiss-siRNA降低kisspeptin表达,观察三组之间Notch1、Jag2、Hes5基因以及蛋白水平表达。结果:1、Notch1通路相关靶基因在URSA患者蜕膜组织中几乎表现为一致的下调,其中表达下降超过3倍数的有NOTCH1、HES5、JAG2、LOR、SH2D1A、FZD2、DLL3、LFNG、PAX5、POFUT1 及 IL178 等。2、URSA患者蜕膜组织中kisspeptin、Notch1、Jag2、Hes5蛋白水平表达明显低于正常妊娠者（P<0.05）。3、光镜下观察蜕膜化过程中子宫内膜基质细胞的变化,细胞呈现变大变圆、核仁增大的典型改变,从24至96h,Notch1及其相关分子Jag2、Hes5基因以及蛋白水平表达逐渐升高（P<0.05）。Kisspeptin组Notch1蛋白水平表达升高,siRNA组则较Control组降低。Notch1、Jag2、Hes5基因在kisspeptin组表达上调,siRNA组表达降低。（P<0.05）结论:1、URSA与正常女性相比,蜕膜组织中Notch1通路相关靶基因表达减少,提示Notch1通路失调导致的蜕膜化过程受损可能是URSA的发病机制。2、URSA患者蜕膜组织kisspeptin、Notch1、Jag2、Hes5蛋白水平表达下降,kisspeptin促进Notch1及其相关分子Jag2、Hes5的表达,kisspeptin可能协同孕酮调控子宫内膜蜕膜化。
二、胰岛素样生长因子系统在人早孕蜕膜基质细胞中的基因表达（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、胰岛素样生长因子系统在人早孕蜕膜基质细胞中的基因表达（论文提纲范文）
（1）FOXO1、VCAM-1在早期妊娠丢失患者绒毛组织中表达的探究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 常用缩写词中英文对照表 |
| 前言 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 实验材料 |
| 1.2 实验方法 |
| 1.3 统计学方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 纳入研究患者一般情况的比较 |
| 2.2 免疫组织化学结果 |
| 2.3 qPCR结果 |
| 3 讨论 |
| 3.1 FOXO1与VCAM-1的特点 |
| 3.2 FOXO1、VCAM-1在早期妊娠丢失绒毛组织中的表达及意义 |
| 4 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 FOXO1与早期妊娠的研究进展 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简介 |
（2）YAP/TAZ在小鼠子宫蜕膜化过程中的作用及调节机制（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| abstract |
| 英文缩写词表 |
| 前言 |
| 第一篇 文献综述 |
| 第1章 哺乳动物胚胎着床和蜕膜化的研究进展 |
| 1.1 哺乳动物胚胎着床 |
| 1.2 子宫内膜蜕膜化 |
| 1.3 胚胎着床和蜕膜化的调控机制 |
| 1.3.1 类固醇激素及其受体 |
| 1.3.2 细胞因子 |
| 1.3.3 转录因子 |
| 1.3.4 骨形态发生蛋白 |
| 1.3.5 Notch信号通路 |
| 1.3.6 其他因子 |
| 1.3.7 氧化应激 |
| 1.4 小结 |
| 第2章 Hippo信号通路的研究进展 |
| 2.1 Hippo信号通路简介 |
| 2.2 YAP/TAZ的生物学功能 |
| 2.2.1 YAP/TAZ在发育过程中的作用 |
| 2.2.2 YAP/TAZ在再生过程中的作用 |
| 2.2.3 YAP/TAZ与癌症发生 |
| 2.3 Hippo-YAP/TAZ的调节机制 |
| 2.3.1 细胞间接触与细胞形状 |
| 2.3.2 细胞极性与细胞粘附 |
| 2.3.3 Wnt/β-Catenin信号通路 |
| 2.3.4 代谢 |
| 2.3.5 G蛋白偶联受体 |
| 2.4 YAP/TAZ与哺乳动物生殖 |
| 2.5 小结 |
| 第二篇 研究内容 |
| 第1章 YAP在小鼠子宫蜕膜化过程中的作用及调节机制 |
| 1.1 材料与方法 |
| 1.1.1 实验动物 |
| 1.1.2 实验试剂 |
| 1.1.3 动物模型的建立 |
| 1.1.4 原位杂交 |
| 1.1.5 小鼠子宫蜕膜细胞与基质细胞的分离培养 |
| 1.1.6 免疫荧光染色 |
| 1.1.7 免疫蛋白印迹(Western blot) |
| 1.1.8 荧光定量PCR |
| 1.1.9 基因过表达与沉默 |
| 1.1.10 双荧光素酶报告基因检测 |
| 1.1.11 细胞转染 |
| 1.1.12 细胞增殖 |
| 1.1.13 细胞周期 |
| 1.1.14 细胞凋亡 |
| 1.1.15 碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase,ALP)活性 |
| 1.1.16 ROS含量检测 |
| 1.1.17 丙二醛(Malondialdehyde,MDA)含量检测 |
| 1.1.18 8-OHd G含量检测 |
| 1.1.19 抗氧化系统及Caspase-3 活性检测 |
| 1.1.20 线粒体膜电位和通透性转换孔的检测 |
| 1.1.21 ATP含量检测 |
| 1.1.22 数据统计分析 |
| 1.2 结果 |
| 1.2.1 YAP m RNA在小鼠早期妊娠子宫中的表达 |
| 1.2.2 YAP在体内和体外人工诱导蜕膜化模型中的表达 |
| 1.2.3 YAP在蜕膜化过程中的作用 |
| 1.2.4 Bmp2 诱导基质细胞中YAP核迁移并增强YAP功能 |
| 1.2.5 YAP通过Rrm2 调控基质细胞的分化 |
| 1.2.6 Bmp2 通过YAP调控Rrm2 的表达 |
| 1.2.7 YAP失活导致基质细胞GSH产生下降并诱导ROS含量升高 |
| 1.2.8 YAP失活导致基质细胞线粒体功能紊乱并抑制蜕膜化 |
| 1.2.9 YAP失活诱导基质细胞凋亡 |
| 1.3 讨论 |
| 1.4 小结 |
| 第2章 TAZ在小鼠子宫蜕膜化过程中的作用及调节机制 |
| 2.1 材料与方法 |
| 2.2 结果 |
| 2.2.1 TAZ在小鼠早期妊娠子宫中的表达 |
| 2.2.2 TAZ在体内和体外人工诱导蜕膜化模型中的表达 |
| 2.2.3 TAZ在蜕膜化过程中的作用 |
| 2.2.4 TAZ介导HB-EGF对蜕膜化的调节 |
| 2.2.5 TAZ保护基质细胞分化免受氧化损伤 |
| 2.2.6 TAZ通过增强基质细胞的抗氧化能力来抵抗氧化应激对基质细胞分化的损伤 |
| 2.2.7 氧化应激状态下TAZ可保护基质细胞线粒体功能 |
| 2.2.8 TAZ可抑制H_2O_2诱导的基质细胞凋亡 |
| 2.2.9 氧化应激状态下TAZ通过Nrf2/ARE/Foxo1 途径增强基质细胞抗氧化能力 |
| 2.3 讨论 |
| 2.4 小结 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 附表1 基因引物序列 |
| 附表2 siRNA序列 |
| 导师简介 |
| 作者简介 |
| 攻读博士学位期间取得的科研成果 |
| 致谢 |
（3）AKT/mTOR/STAT3信号通路在稽留流产中的作用及机制研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 第一章 前言 |
| 1.1 稽留流产概述 |
| 1.2 滋养细胞侵袭能力在胚胎发育中的作用 |
| 1.3 MMPs和 TIMPs在胚胎发育中的作用 |
| 1.4 AKT/m TOR信号通路 |
| 1.5 STAT3 信号通路 |
| 1.6 MMPs和 TIMPs与 AKT/m TOR/STAT3 信号通路的关系 |
| 1.7 研究目的和意义 |
| 第二章 材料与方法 |
| 2.1 实验设计 |
| 2.1.1 研究对象和分组 |
| 2.1.2 技术路线图 |
| 2.2 实验材料 |
| 2.2.1 主要试剂及仪器 |
| 2.2.2 主要溶液配制 |
| 2.3 实验方法 |
| 2.3.1 绒毛组织HE染色病理切片制备 |
| 2.3.2 qRT-PCR检测步骤 |
| 2.3.3 Wes~(TM)全自动蛋白质表达定量分析系统检测步骤 |
| 2.3.4 免疫组化染色方法 |
| 2.4 统计分析 |
| 第三章 结果 |
| 3.1 一般临床资料分析 |
| 3.2 绒毛组织病理形态观察 |
| 3.3 绒毛组织AKT/m TOR信号通路相关因子的基因和蛋白表达水平 |
| 3.3.1 相关基因m RNA表达水平 |
| 3.3.2 相关蛋白表达水平 |
| 3.4 绒毛组织STAT3 信号通路相关因子的基因和蛋白表达水平 |
| 3.4.1 相关基因m RNA表达水平 |
| 3.4.2 相关蛋白表达水平 |
| 3.5 两组胚胎组织中p-STAT3 蛋白的表达定位 |
| 3.5.1 绒毛组织中表达定位 |
| 3.5.2 蜕膜组织中表达定位 |
| 3.6 绒毛组织MMPs、TIMPs基因和蛋白表达水平 |
| 3.6.1 基因m RNA表达水平 |
| 3.6.2 蛋白表达水平 |
| 第四章 讨论 |
| 4.1 绒毛组织结构病理形态改变分析 |
| 4.2 AKT/m TOR信号通路与稽留流产的关系 |
| 4.3 STAT3 信号通路与稽留流产的关系 |
| 4.4 基质金属蛋白酶及其抑制剂与稽留流产的关系 |
| 第五章 结论 |
| 5.1 结论 |
| 5.2 研究不足与展望 |
| 参考文献 |
| 缩略词表 |
| 在学期间研究成果 |
| 致谢 |
（4）PAD4在胚胎着床与蜕膜化过程中的表达与调节（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 英文缩略语表 |
| 前言 |
| 1、PAD4 在人子宫内膜中的表达 |
| 实验材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 2、PAD4 在小鼠子宫中的表达 |
| 实验材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 3、PAD4 在类固醇激素调节模型小鼠子宫中的表达 |
| 实验材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 4、PAD4 在小鼠蜕膜化子宫和体外培养细胞中的表达 |
| 实验材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 本研究创新性的自我评价 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 一、文献综述 PAD4结构和作用机理与生理作用的关系 |
| 参考文献 |
| 二、致谢 |
| 三、个人简介 |
（5）PI3K/AKT信号通路在IGF1诱导HTR-8/SVneo细胞分泌HCG和Pg的作用研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 第一章 前言 |
| 1.1 胚胎停育概述 |
| 1.2 IGF1/IGF1R的功能及其对胚胎发育的影响 |
| 1.3 PI3K/AKT信号通路与细胞凋亡 |
| 1.4 HCG和孕酮在妊娠早期的重要意义 |
| 1.5 本研究的目的及意义 |
| 第二章 材料与方法 |
| 2.1 研究设计及技术路线图 |
| 2.2 实验材料 |
| 2.2.1 细胞株 |
| 2.2.2 实验试剂与仪器 |
| 2.2.3 主要试剂配置 |
| 2.3 实验方法 |
| 2.3.1 细胞培养 |
| 2.3.2 细胞计数法绘制生长曲线 |
| 2.3.3 CCK-8 实验 |
| 2.3.4 实验分组和细胞处理 |
| 2.3.5 实时荧光定量PCR法(qRT-PCR)测定基因表达水平 |
| 2.3.6 Wes全自动蛋白表达分析系统检测蛋白表达水平 |
| 2.3.7 流式细胞术测定细胞总凋亡水平 |
| 2.3.8 ELISA测定细胞上清中HCG和 Pg的分泌水平 |
| 2.4 统计分析 |
| 第三章 结果 |
| 3.1 细胞基本情况 |
| 3.2 细胞存活率 |
| 3.3 HTR-8/SVneo细胞PI3K/AKT信号通路的基因和蛋白表达情况 |
| 3.3.1 PI3K和 AKT m RNA表达量 |
| 3.3.2 PI3K/AKT信号通路蛋白表达量 |
| 3.4 HTR-8/SVneo细胞中凋亡相关因子的基因以及蛋白表达情况 |
| 3.4.1 凋亡相关因子的m RNA表达量 |
| 3.4.2 细胞凋亡相关因子的蛋白表达量 |
| 3.5 细胞凋亡率 |
| 3.6 IGF1-PI3K/AKT信号通路在HCG和 Pg分泌中的作用 |
| 第四章 讨论 |
| 4.1 IGF1具有促HTR-8/SVneo细胞增殖的活性 |
| 4.2 IGF1 对细胞PI3K/AKT信号通路的激活作用 |
| 4.3 IGF1对HTR-8/SVneo细胞的抗凋亡作用 |
| 4.4 PI3K/AKT信号通路参与IGF1 诱导细胞分泌HCG |
| 第五章 结论与展望 |
| 5.1 主要结论 |
| 5.2 不足之处与展望 |
| 参考文献 |
| 缩略词表 |
| 在学期间研究成果 |
| 致谢 |
（6）岩藻糖基转移酶Ⅳ（FUT4）促进子宫内膜蜕膜过程的作用及机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| (一)前言 |
| (二)材料与方法 |
| 1.实验材料 |
| 2.实验方法 |
| (三)结果 |
| 1.FUT4/LeY/LTL在人增生期、分泌期、正常早孕及难免流产子宫内膜组织中的表达 |
| 2.子宫内膜蜕膜化促进FUT4 表达 |
| 3.FUT4 促进子宫内膜蜕膜化 |
| 4.FUT4 促进蜕膜细胞增殖 |
| 5.FUT4 促进基质细胞LeY生成 |
| 6.FUT4 促进CD47上LeY合成,激活PDK/AKT/GSK-3β信号通路,促进子宫内膜蜕膜化 |
| (四)讨论 |
| (五)结论 |
| (六)参考文献 |
| 综述 N-糖基化在女性子宫内膜蜕膜化过程中发挥的作用 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
（7）多囊卵巢综合征对于围着床期子宫中免疫细胞及细胞外基质的影响（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 第一章 前言 |
| 1.1 多囊卵巢综合征流行病学 |
| 1.2 多囊卵巢综合征的诊断和病理生理 |
| 1.2.1 PCOS的诊断标准 |
| 1.2.2 PCOS的病理生理 |
| 1.3 多囊卵巢综合征与不孕症 |
| 1.4 妊娠早期子宫中免疫细胞的研究现状 |
| 1.4.1 妊娠早期免疫耐受 |
| 1.4.2 各类免疫细胞在妊娠早期子宫中的变化 |
| 1.4.2.1 巨噬细胞 |
| 1.4.2.2 树突状细胞 |
| 1.4.2.3 中性粒细胞 |
| 1.4.2.4 肥大细胞 |
| 1.4.2.5 B细胞 |
| 1.5 围着床期细胞间连接和细胞外基质的变化 |
| 1.5.1 细胞黏着分子-钙粘蛋白 |
| 1.5.2 膜细胞骨架连接蛋白-埃兹蛋白 |
| 1.5.3 细胞外基质-层粘连蛋白 |
| 1.5.4 细胞外基质-胶原蛋白IV |
| 1.5.5 细胞质膜表面的粘多糖—糖萼 |
| 1.6 多囊卵巢综合征动物模型的构建 |
| 1.7 本论文的研究目的、意义及技术路线 |
| 第二章 材料与方法 |
| 2.1 动物模型的构建 |
| 2.1.1 实验动物 |
| 2.1.2 药物配制 |
| 2.1.3 动物材料收集 |
| 2.1.4 PCOS小鼠模型 |
| 2.1.5 早期妊娠 |
| 2.1.6 围着床期DHEA短期处理早期妊娠小鼠 |
| 2.1.7 围着床期DHEA处理假孕小鼠 |
| 2.1.8 DHEA处理卵巢切除小鼠 |
| 2.2 PCOS小鼠模型子宫中m RNA表达谱的研究 |
| 2.2.1 研究对象 |
| 2.2.2 样品总RNA提取 |
| 2.2.3 样品RNA检测 |
| 2.2.4 RNA文库的构建与质量检测 |
| 2.2.5 上机测序 |
| 2.2.6 数据分析 |
| 2.3 人子宫内膜收集 |
| 2.4 免疫组织化学 |
| 2.4.1 试剂配制 |
| 2.4.2 免疫组化中使用的抗体 |
| 2.4.3 石蜡包埋及切片 |
| 2.4.4 具体操作步骤 |
| 2.5 免疫荧光 |
| 2.5.1 试剂配制 |
| 2.5.2 免疫荧光中使用的抗体 |
| 2.5.3 具体操作步骤 |
| 2.6 卵巢组织苏木精-伊红染色 |
| 2.6.1 石蜡切片脱蜡复水 |
| 2.6.2 染色步骤 |
| 2.7 甲苯胺蓝染色 |
| 2.7.1 染色试剂配制 |
| 2.7.2 甲苯胺蓝染色步骤 |
| 2.8 Western Blot |
| 2.8.1 所用试剂配制 |
| 2.8.2 制备蛋白样品 |
| 2.8.3 测定蛋白浓度并制备上样液 |
| 2.8.4 SDS-PAGE凝胶电泳 |
| 2.8.5 蛋白条带转膜 |
| 2.8.6 免疫印迹 |
| 2.9 Real-time PCR |
| 2.9.1 样品总RNA提取 |
| 2.9.2 反转录 |
| 2.9.3 qPCR引物设计 |
| 2.9.4 qPCR具体步骤 |
| 2.9.5 数据分析 |
| 2.10 统计学分析 |
| 第三章 实验结果 |
| 3.1 PCOS模型的成功建立 |
| 3.1.1 表观及着床结局指标 |
| 3.1.2 病理学指标 |
| 3.1.3 血清生化指标 |
| 3.1.4 子宫中雄激素受体测定 |
| 3.2 PCOS模型小鼠子宫的m RNA表达谱测序结果 |
| 3.2.1 RNA质量评估 |
| 3.2.2 原始测序数据过滤及质量评估 |
| 3.2.3 参考基因组比对 |
| 3.2.4 基因表达分布和样本间相关性 |
| 3.2.5 差异基因的筛选 |
| 3.2.6 富集分析 |
| 3.3 DHEA对子宫免疫细胞数量及定位的影响 |
| 3.3.1 中性粒细胞 |
| 3.3.2 巨噬细胞 |
| 3.3.3 树突状细胞(DC) |
| 3.3.4 肥大细胞 |
| 3.3.5 B细胞 |
| 3.4 DHEA对子宫细胞间连接和细胞外基质的影响 |
| 3.4.1 埃兹蛋白 |
| 3.4.2 钙黏蛋白 |
| 3.4.3 细胞外基质-层粘连蛋白 |
| 3.4.4 胶原蛋白IV |
| 3.4.5 CD31 |
| 3.4.6 UEA受体 |
| 第四章 全文讨论 |
| 4.1 PCOS小鼠模型的成功构建 |
| 4.2 PCOS小鼠妊娠第4 天子宫m RNA表达谱的启示 |
| 4.3 PCOS围着床期子宫中免疫细胞异常变化 |
| 4.4 PCOS 围着床期子宫上皮细胞间连接的改变 |
| 4.5 PCOS围着床期子宫细胞外基质的变化 |
| 4.6 PCOS围着床期子宫上皮细胞质膜表面糖萼的变化 |
| 第五章 结论 |
| 5.1 主要结论 |
| 5.2 创新点 |
| 5.3 不足与展望 |
| 参考文献 |
| 缩略词表 |
| 在学期间研究成果 |
| 致谢 |
| 附件 |
（8）富血小板血浆（Platelet-rich Plasma，PRP）对RL95-2细胞增殖及对子宫内膜容受性的影响（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 英文缩略词表 |
| 一、前言 |
| 二、PRP对人子宫内膜RL95-2细胞增殖的影响 |
| 1 材料 |
| 1.1 一般资料 |
| 1.2 主要实验试剂及耗材 |
| 1.3 主要实验试剂配制 |
| 2. 方法 |
| 2.1 PRP的制备 |
| 2.2 RL95-2细胞的培养 |
| 2.3 Elisa法测量细胞上清液各种生长因子浓度 |
| 2.4 MTT法测量不同浓度PRP对RL95-2细胞增殖活性的影响 |
| 3. 结果 |
| 3.1 RL95-2细胞培养 |
| 3.2 PRP在体外不同时间释放生长因子浓度曲线 |
| 3.3 MTT法测量不同浓度的PRP与RL95-2细胞共培养不同时间细胞活性 |
| 4. 讨论 |
| 三、PRP对3D立体培养RL95-2细胞的影响 |
| 1 材料 |
| 1.1 一般资料 |
| 1.2 主要实验试剂及耗材 |
| 1.3 主要实验仪器 |
| 2. RL95-2细胞3D培养模型的建立 |
| 3 结果 |
| 4、讨论 |
| 四、PRP对薄型子宫内膜模型SD大鼠子宫内膜厚度及容受性的影响 |
| 1 实验准备 |
| 1.1 实验动物 |
| 2 实验步骤 |
| 2.1 薄型子宫内膜SD大鼠模型造模 |
| 2.2 子宫内膜石蜡包埋切片及HE染色 |
| 2.3 免疫组织化学染色 |
| 2.4 蛋白定量(western-blot)分析步骤 |
| 2.5 实时定量PCR分析 |
| 3. 实验结果 |
| 3.1 HE染色结果 |
| 3.2 免疫组织化学结果 |
| 3.3 Western-blot结果 |
| 3.4 RT-PCR结果 |
| 4. 讨论 |
| 五、PRP宫腔灌注联合子宫内膜微刺激对反复着床失败及薄型子宫内膜患者冻胚复苏妊娠率的影响 |
| 1 患者收集 |
| 2. 主要实验仪器及耗材 |
| 2.1 主要仪器 |
| 2.2 主要耗材 |
| 3. 治疗方法 |
| 3.1 内膜准备方案 |
| 3.2 子宫内膜微刺激 |
| 3.3 PRP宫腔灌注 |
| 3.4 移植胚胎 |
| 3.5 随访 |
| 3.6 统计学分析 |
| 4 结果 |
| 5 讨论 |
| 六、全文总结 |
| 七、综述 子宫内膜容受性的生物学标记 |
| 八、参考文献 |
| 九、致谢 |
| 十、攻读学位期间发表的学位论文 |
| 十一、英文论文 |
（9）促性腺激素释放激素激动剂在冻融胚胎移植周期中的临床疗效和作用机制研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 第一章 绪论 |
| 1.1 研究背景及意义 |
| 1.2 研究现状 |
| 1.2.1 GnRH-a在冻融胚胎移植周期中的临床疗效 |
| 1.2.2 GnRH-a对子宫内膜容受性的影响 |
| 1.2.3 GnRH-a对蜕膜化的影响 |
| 1.3 本论文主要研究内容 |
| 1.4 本文章节安排 |
| 第二章 回顾性分析Gn RH-a在 FET周期中的临床疗效 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 研究对象与方法 |
| 2.2.1 研究对象 |
| 2.2.2 研究方法 |
| 2.2.3 实验方法 |
| 2.3 统计学分析 |
| 2.4 实验结果 |
| 2.4.1 胚胎移植日子宫内膜下血流参数比较 |
| 2.4.2 临床妊娠结局比较 |
| 2.5 讨论 |
| 2.6 小结 |
| 第三章 子宫内膜组织容受性比较 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 研究材料与方法 |
| 3.2.1 研究材料 |
| 3.2.2 研究方法 |
| 3.2.3 实验方法 |
| 3.3 统计学方法 |
| 3.4 实验结果 |
| 3.4.1 黄体期内膜中LIF、整合素β3等容受性标志分子表达量比较 |
| 3.4.2 移植日内膜内膜容受性比较 |
| 3.4.3 内膜中p-ERK1/2和p-stat3 表达 |
| 3.4.4 has-mi R-125b-5p的调控作用 |
| 3.4.5 has-mi R-223-3p的调控作用 |
| 3.4.6 has-mi R-27a-3p的调控作用 |
| 3.5 讨论 |
| 3.6 小结 |
| 第四章 GnRH-a联合雌、孕激素对内膜细胞增殖及容受性标志物表达的影响 |
| 4.1 引言 |
| 4.2 研究材料与方法 |
| 4.2.1 研究材料 |
| 4.2.2 研究方法 |
| 4.2.3 实验方法 |
| 4.3 统计学方法 |
| 4.4 实验结果 |
| 4.4.1 人子宫内膜细胞分离、纯化和鉴定结果 |
| 4.4.2 GnRH-a抑制内膜细胞增殖 |
| 4.4.3 GnRH-a诱导子宫内膜细胞凋亡 |
| 4.4.4 GnRH-a联合雌、孕激素对子宫内膜细胞增殖的影响 |
| 4.4.5 GnRH-a联合雌、孕激素对子宫内膜细胞容受性的影响 |
| 4.5 讨论 |
| 4.6 小结 |
| 第五章 GnRH-a对子宫内膜基质细胞蜕膜化的影响 |
| 5.1 引言 |
| 5.2 研究材料与方法 |
| 5.2.1 实验材料 |
| 5.2.2 实验方法 |
| 5.3 统计学方法 |
| 5.4 实验结果 |
| 5.4.1 基质细胞蜕膜化模型的构建 |
| 5.4.2 GnRH-a对基质细胞蜕膜化的影响 |
| 5.4.3 GnRH-a对基质细胞蜕膜化影响的机制研究 |
| 5.5 讨论 |
| 5.6 小结 |
| 第六章 结论与展望 |
| 6.1 主要结论 |
| 6.2 展望 |
| 参考文献 |
| 在学期间的研究成果 |
| 致谢 |
（10）Kisspeptin协同孕酮通过Notch1信号通路调控子宫内膜蜕膜化的研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 引言 |
| 第一部分: URSA与正常早孕女性蜕膜中notch1信号通路基因筛选 |
| 实验材料 |
| 实验方法 |
| 实验结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 第二部分 URSA患者蜕膜组织中kisspeptin、Notch1、Jag2、Hes5的表达 |
| 实验材料 |
| 实验方法 |
| 实验结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 第三部分 体外蜕膜化的观察以及子宫内膜基质细胞中Notch1及其相关分子表达 |
| 实验材料 |
| 实验方法 |
| 实验结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述: 子宫内膜蜕膜化的机制进展 |
| 参考文献 |
| 缩略词表 |
| 致谢 |
四、胰岛素样生长因子系统在人早孕蜕膜基质细胞中的基因表达（论文参考文献）
- [1]FOXO1、VCAM-1在早期妊娠丢失患者绒毛组织中表达的探究[D]. 贾青青. 山西医科大学, 2021(01)
- [2]YAP/TAZ在小鼠子宫蜕膜化过程中的作用及调节机制[D]. 于海帆. 吉林大学, 2021
- [3]AKT/mTOR/STAT3信号通路在稽留流产中的作用及机制研究[D]. 白清丽. 兰州大学, 2021(09)
- [4]PAD4在胚胎着床与蜕膜化过程中的表达与调节[D]. 张元媚. 锦州医科大学, 2021(01)
- [5]PI3K/AKT信号通路在IGF1诱导HTR-8/SVneo细胞分泌HCG和Pg的作用研究[D]. 白瑾. 兰州大学, 2021(09)
- [6]岩藻糖基转移酶Ⅳ（FUT4）促进子宫内膜蜕膜过程的作用及机制研究[D]. 王雪吟. 大连医科大学, 2021(01)
- [7]多囊卵巢综合征对于围着床期子宫中免疫细胞及细胞外基质的影响[D]. 吴洋. 兰州大学, 2021(09)
- [8]富血小板血浆（Platelet-rich Plasma，PRP）对RL95-2细胞增殖及对子宫内膜容受性的影响[D]. 刘玲. 山东大学, 2020(04)
- [9]促性腺激素释放激素激动剂在冻融胚胎移植周期中的临床疗效和作用机制研究[D]. 安君霞. 兰州大学, 2020(04)
- [10]Kisspeptin协同孕酮通过Notch1信号通路调控子宫内膜蜕膜化的研究[D]. 钟惠. 苏州大学, 2020(02)