一、Effects of Pulsed Electric Fields on DNA Synthesis in an Osteoblast-Like Cell Line (UMR-106)（论文文献综述）
张凯亮[1]（2020）在《钛基植入材料涂层的生物活性及其对口腔菌群遗传多样性的影响》文中进行了进一步梳理研究目的医疗植入体在临床中得以普遍应用,其根本在于其与其周围组织之间形成了骨组织的整合、长入以及融合过程。―骨整合理论‖揭示所有医用植入材料与人体骨之间成功的发生结合,是植入/种植成功的关键要素。多项临床研究表明,植入材料本身的理化、机械力学性能以及植入后局部炎症是成功的两大主要影响因素。而钛（Ti）及其钛合金（Ti6Al4V）是目前医学临床中应用最为广泛的植入体材料,具有良好的理化性能、生物相容性和骨结合性能,是医用植入材料的―金标准‖。然而,因其易发生氧化的缘故,纯钛在空气中极易形成一层致密的氧化物薄膜,从而导致其出现生物惰性或者因离子释放造成过敏等不良反应。通常由于口腔复杂的微环境中存在大量的细菌微生物,在植入体形成骨结合的过程中不可避免地在其周围形成细菌滞留、定殖,造成机体细胞和口内微生物竞争性地附着于植入材料表面,当宿主机体的免疫反应平衡被打破,将引起植入体周围感染并最终导致种植手术失败。目前预防植入体周围的感染缺乏有效手段,因此,探索研发新型的植入体功能化材料对于解决这一医学难题显得至关重要。本研究基于不同的材料改性方法对纯钛以及钛合金进行改性,赋予其良好的生物相容性、抗菌抗炎性能,并评价其对口腔微生物群落遗传多样性的影响,以期为临床中骨组织修复与重建、软组织诱导再生提供一种优选策略。研究方法1.采用溶胶-凝胶法在纯钛表面成功制备不同浓度的含钇羟基磷灰石涂层（Y-HA）;通过扫描电子显微镜（SEM）、原子力学显微镜（AFM）、X射线衍射仪（XRD）以及X射线光电子能谱仪（XPS）等对制备涂层的微观形貌及结构进行表征分析;并将人牙龈成纤维细胞（HGF）接种于不同涂层样品表面分别培养1、3、5天观察,进行CCK-8细胞增殖能力检测;采用SEM和AFM观察细胞的生长铺展、粘附情况,ELISA法检测HGF细胞分泌Col-1的情况;进一步将变形链球菌在不同涂层样品上培养后,检测改性涂层的抗菌性能。2.采用微弧氧化技术制备含不同浓度钇（Y）的二氧化钛（Ti O2）微孔涂层,并利用SEM、AFM、XRD及XPS等对制备涂层的微观形态及结构进行表征检测,通过免疫荧光（IF）及免疫印迹（WB）等方法观察不同载钇涂层对小鼠胚胎成骨前体细胞（MC3T3-E1）、HGF的增殖、生长铺展形态、细胞粘附、相关骨形态发生蛋白和基因表达的影响,进一步在改性涂层表面培养大肠杆菌及金黄色葡萄球菌,测试改性涂层的抗菌性能。3.基于遗传学视角研究新改性材料对口腔菌群遗传多样性的影响,以评估其抗菌能力。采集临床中健康的成年人唾液,与实验1及2中制备的新改性材料进行共培养,并与未培养唾液形成对照,通过16Sr-DNA高通量测序及生物信息学分析改性涂层对口腔菌群遗传多样性的影响。4.通过构建斑马鱼材料植入模型考察新涂层材料的抗炎性能。本实验将Y0-Ti、Y7-HA-Ti以及Y9-Ti O2复合材料以钛丝表面涂层形式植入斑马鱼下腹腔后,定位于臀部肌肉组织内,观察不同材料周围组织的炎症反应,并使用ELISA法检测炎症因子表达量,组织形态观测评估植入涂层材料对斑马鱼体内抗炎作用。研究结果1.a)材料学表征结果显示:掺入不同浓度钇的羟基磷灰石涂层在纯钛片表面制备成功,且不同浓度钇的掺杂不会显着影响羟基磷灰石涂层的微形貌、粗糙度、晶相结构等基本理化性能;b)细胞实验结果显示:Y-HA组细胞增殖能力优于Ti组（P<0.05）、掺7%钇的羟基磷灰石涂层（Y7-HA）表面的HGF细胞生长铺展形态较其他组更优（P<0.05）、细胞刚度在羟基磷灰石（HA）组和Y7-HA组较Ti组相比明显较高（P<0.05）;c)分子实验表明HGF合成的Col-1水平与Y的掺杂浓度和细胞培养时间成正比;d)抗菌实验表明Y-HA可以有效减少变形链球菌的增殖和粘附（P<0.05）。2.a)材料学实验表明:实验中成功制备了载钇二氧化钛（Y-Ti O2）微孔涂层,且基本理化性能较未载钇（Y0-Ti O2）组无明显变化;b)细胞学实验结果表明,MC3T3-E1及HGF在载钇二氧化钛涂层材料表面的增殖能力较对照组显着增强（P<0.05）;c)分子实验表明,在第1、3、7天,Y-Ti O2涂层材料组的碱性磷酸酶（ALP）、转化生长因子（TGF-β）以及骨形态发生蛋白（BMP-2）的表达量均显着增加（P<0.05）,且茜素红矿化染色钙结节的量与钇浓度掺入量呈正相关;d)抗菌实验表明,较高浓度的载钇涂层具有显着的抗菌性能。3.不同方法制备的掺钇抗菌涂层对口腔微生物菌群多样性整体分布的影响不明显,α多样性及β多样性均未发生明显变化,同时未引起口腔内细菌丰度和种类的明显改变,但口腔中放线菌及杆菌等有害菌的丰度有所下降。4.复合材料植入后,检测相关炎症因子白介素-6（IL-6）和肿瘤坏死因子（TNF-α）的水平表达无差异,组织形态学观测三组不同植入的斑马鱼肌肉组织均显示轻微炎症反应,但镜下观察三组间的炎性细胞浸润程度并未见明显差异。研究结论1.纯钛表面的Y-HA涂层提高了材料的生物相容性且减少了细菌的粘附,该载钇改性涂层表现出一定的抗菌特性,其抗菌性不仅能降低口腔中放线菌等有害细菌的丰度,且未对唾液整体菌群产生明显影响,这一特点印证其在临床潜在应用的可行性,可用于医用植入物,并能促进植入物周围软组织的整合与再生。2.Y-Ti O2涂层具有良好的生物相容性,且较高浓度含钇涂层具有优良的抗菌性能。因此,Y-Ti O2微孔涂层能够促进并诱导植入物周围硬组织以及软组织的结合与修复再生,这提示新型改性材料可能具有良好的植入应用前景。3.本实验研究了不同改性钛基材料的体内炎症反应情况,证实改性材料未引起明显的炎症反应,未加重炎症的发展,为其在临床植入中的应用提供了实验基础。
陈雷[2]（2017）在《人诱导性多能干细胞（iPSc）对人肺癌A549细胞裸鼠移植瘤生长、转移作用的研究》文中研究指明人诱导性多能干细胞（human induced pluripotent stem cells,hiPS cells）是通过基因稳定转染技术将特定的转录因子导入人的体细胞,使体细胞重编程,形成具有多能性干细胞分化能力的类似胚胎干细胞形态的多潜能细胞。人iPS细胞具有的多能干性及分化潜能使其成为基础研究的有利工具,本实验通过裸鼠移植瘤模型研究iPS细胞对人非小细胞肺癌细胞A549细胞移植瘤生长及转移的作用。目的:建立裸鼠iPS细胞和A549细胞移植瘤模型,观察记录肿瘤成瘤情况,绘制肿瘤体积生长曲线;利用小动物活体成像技术,以稳定表达荧光报告基因的细胞成瘤模型为对象,观察裸鼠移植瘤动物模型的发展及转移等生物学特性,探究iPS细胞对人非小细胞肺癌细胞肿瘤的影响。方法:采用BALB/c裸小鼠皮下成瘤方法,注射不同种类、处理的细胞,观察A549细胞和iPS细胞的移植瘤的表型和生长变化。利用荧光蛋白稳定表达的基因稳转细胞,建立了移植A549细胞和iPS细胞的动物肿瘤模型,采用小动物活体成像系统观察荷瘤裸鼠成像效果,观察不同时期两种细胞在裸鼠主要脏器中的荧光表达及分布情况。采用组织切片的方法,观察iPS细胞及A549细胞在肿瘤及脏器中的形态、结构及分化特征。结果:成功建立了小鼠皮下成瘤模型,初步了解A549细胞肿瘤的生物学特征。活体成像系统检测得出GFP在小鼠的肝脏中高表达,而RFP在肝脏中表达量低或不表达。揭示在早期的肿瘤细胞转移中,iPS细胞更倾向于肝脏方向转移。在肿瘤组织切片观察时,发现有可能共表达GFP和RFP两种蛋白的细胞,表明在肿瘤生长过程中两种细胞可能出现融合。
雷红玮[3]（2013）在《基于磁场刺激的细胞生物效应机理研究》文中进行了进一步梳理对生物在电磁场中的生理生化反应的检测是涉及到生物学和电磁学的多学科交叉领域。生物本质由多种元素构成的,体内普遍存在电荷移动,随着电子产业的兴起,电磁波的存在越来越广泛,电磁辐射也越来越密集,因此处于各种电磁场中的生物体必然受到影响。本论文对磁场在多方面多层次的生物效应进行了概述,并分析了磁场激发生物效应的机制,通过实验研究和检测了电磁场对生物体多方面的影响。根据实验需要,本论文设计研制了适合本论文中不同实验要求的磁场刺激器和信号放大装置。一款为能够输出单脉冲和连续脉冲的强磁场刺激器；另外一款为可调控的低强度工频磁场刺激器。本论文还针对生物电信号较弱的特点,设计了动物心电信号放大和采集装置,满足了本论文中生物实验需求。本论文通过对实验动物蟾蜍、家兔、小鼠的开胸在体心脏进行磁场刺激作用,探讨磁场对心肌细胞机能的生物效应。实验对磁场刺激下动物的心率（HR）,心室射血时间（ET）,心肌收缩幅度（△D）等机能进行检测,结果表明,强脉冲磁场刺激能够增强心肌细胞收缩机能,对动物心率也有一定促进作用,但磁场刺激对心率的影响在不同种类的动物中表现不同,存在明显的“窗口效应”。实验结果为磁刺激代替电刺激对心脏复律和除颤提供了实验证据。本论文采用了MTT法、DNA电泳法和流式细胞法检测磁刺激对细胞增殖与凋亡的影响。MTT比色法检测细胞增殖活力,实验结果表明工频磁场刺激具有促进离体细胞增殖率的作用,但工频磁场刺激对细胞增殖的作用是非线性,这一增殖效果与磁场强度及作用时间相关,存在明显“窗口效应”。细胞DNA的琼脂凝胶电泳实验结果中未出现细胞凋亡所特有的梯状谱带。实验采用流式细胞术分析细胞周期分布,细胞凋亡状况。实验结果亦不支持工频磁场对离体细胞凋亡存在明显诱导作用。本论文对辐射敏感蛋白HPRT的核酸序列和氨基酸序列进行了生物信息学研究,在分子水平上讨论了不同物种间HPRT核酸和蛋白的进化同源性,构建了分子进化树。对离体培养细胞进行梯度强度的工频磁场连续刺激,提取各实验组细胞HPRT的cDNA,对该基因序列进行测定分析。将检测结果与Genbank中序列进行比对,比对结果并未发现明显的碱基点突变,说明在本论文所设定的梯度磁场强度与作用时间内,工频磁场刺激具有一定的生物安全性,不会在分子水平令细胞遗传物质产生基因突变。本论文还采用了多种生物学检测方法对人淋巴细胞中端粒酶活性进行检测分析。结果表明：外周血淋巴细胞在被PHA和rhIL-2刺激活化后,端粒酶活性升高,升高的端粒酶活性能够被JAK抑制剂所抑制,提示端粒酶活性的升高依赖JAK信号通路。升高的端粒酶活性是由于hTERT蛋白表达的增高,而hTERT表达增高的原因是由于hTERT的nRNA表达水平升高,实验还表明这些活动都同样依赖于JAK信号通路。本研究深化了对端粒酶活性以及hTERT调控机制的认识。最后,本论文在对以往工作认真总结的基础上,展望了今后的工作,对进一步深入研究进行了规划。
李飞江[4]（2012）在《低强度脉冲电磁场影响大鼠成骨细胞的参数筛选》文中进行了进一步梳理脉冲电磁场（pulsed electromagnetic fields, PEMF）应用于临床治疗骨折、骨不连等骨病已经有30多年，相对于其他物理及化学治疗方法，PEMF具有经济、无创、安全等优势。国内外学者对其作用机理开展了大量研究，但一直没有定论。虽然诸多临床和动物实验研究结果表明PEMF能够显着促进骨愈合，提高骨量，但是各个研究组对于PEMF的参数的选择都不尽相同，这影响了PEMF生物效应研究实验方案的科学性和实验结果的可重复性。在此背景下，我们以大鼠成骨细胞为实验对象，主要研究了不同特征参数（频率、场强、占空比）PEMF对其增殖和分化的影响，以期筛选出最佳的PEMF作用参数，为开展PEMF的基础研究和临床应用提供新的思路和理论依据。本研究的主要内容与结果如下：1、低强度PEMF发生器的设计与制作此发生器是实验平台的主要组成部分，由两部分组成：一是信号发生器，可以产生频率0～100Hz、电流强度0～10A可调的脉冲群波、单脉冲波、三角波、正弦波信号，脉冲群波、单脉冲波占空比可调；此外，通过理论计算和分析，绕制了螺线管，经实际检测，发生的磁场强度范围（0～4mT）和均匀度满足了开展实验的要求。2、大鼠成骨细胞的原代提取、纯化及鉴定提取新生大鼠（<24h）的颅盖骨成骨细胞进行原代培养，镜下观察细胞沿骨块周围呈放射状生长，折光性强、体积大，碱性磷酸酶（ALP）染色、茜苏红染色均呈阳性。3、不同强度PEMF对成骨细胞的影响固定频率15Hz、占空比50%，分别采用为0.3～4.0mT范围内的8种不同强度的PEMF作用于成骨细胞，检测细胞增殖和ALP活性的变化。与对照组比较，0.5mT、0.7mT、1.0mT、2.0mT的强度能显着促进成骨细胞增殖，0.3mT、2.5mT、3.0mT实验组细胞增殖无明显变化，4.0mT组对细胞增殖显着抑制；0.5mT、0.7mT、1.0mT、2.0mT组显着增强成骨细胞ALP活性，2.5mT、3.0mT对细胞ALP活性无影响，0.3mT、4.0mT对细胞ALP活性有抑制作用。4、不同频率PEMF对成骨细胞的影响固定强度1mT、占空比50%，分别采用15Hz、30Hz、50Hz、75Hz、100Hz不同频率的PEMF作用于成骨细胞，检测细胞增殖和ALP活性的变化。与对照组比较，15Hz、30Hz和50Hz实验组成骨细胞增殖变化具有显着性差异，75Hz组无明显变化，100Hz组显着抑制细胞增殖；15Hz、30Hz组明显增强成骨细胞活性，50Hz组无明显变化，100Hz组显着抑制细胞ALP活性。5、不同占空比PEMF对成骨细胞的影响固定强度1mT、频率15Hz，分别采用占空比为10%、20%、40%、60%、80%的PEMF作用于成骨细胞，并检测细胞增殖和ALP活性的变化。与对照组比较，PEMF占空比为20%、40%、60%的实验组明显促进成骨细胞的增殖，10%、80%实验组无明显变化；占空比为10%、20%、40%、60%的实验组细胞ALP活性显着增强，而80%组无明显变化。6、不同波形电磁场对成骨细胞的影响分别采用脉冲群电磁场、单脉冲电磁场、正弦波电磁场、三角波电磁场和静磁场作用于成骨细胞，并检测细胞增殖和ALP活性的变化。与对照组比较，脉冲群电磁场、单脉冲电磁场明显促进成骨增殖，正弦波电磁场和静磁场对细胞增殖的影响无明显，而三角波电磁场对细胞增殖有明显的抑制作用；脉冲群电磁场、单脉冲电磁场和静磁场均能显着促进细胞分化，三角波电磁场显着抑制细胞分化。
刘雯[5]（2011）在《纳秒脉冲电场对成骨细胞影响的初步研究》文中研究表明多种口腔疾患临床治疗需要骨组织修复与重建。现有条件下,骨组织修复与重建是一个漫长的过程,亟待新方法的出现促进骨组织修复与重建。运用电刺激进行骨的相关治疗已有多年历史,纳秒脉冲电场（nanosecond pulsed electric fields, nsPEFs ）作为一种高场强短脉宽电脉冲,其生物学效应不同于一般电刺激。因此,研究nsPEFs作用于成骨细胞的生物学效应是一个重要的方向。目前,对nsPEFs细胞生物学效应的研究已发现nsPEFs存在“窗口效应”,而对于“窗口效应”具体范围尚无报道。本实验主要利用10-100ns脉宽,5-15kv/cm场强的电场刺激体外培养的成骨样细胞MG-63,采用正交实验设计方法探讨nsPEFs的“窗口效应”,选择最优参数组合,通过MTT,流式细胞术（FCM）检测FAS抗原表达,吖啶橙（AO）/溴化乙啶（EB）染色等方法,从多个层面,研究nsPEFs刺激对成骨样细胞MG-63细胞存活率和形态的变化。根据实验结果得出以下结论:1 10-100ns,5-15kv/cm脉冲电场对成骨样细胞MG-63存在“窗口效应”,其生物学效应为细胞的早期凋亡。2利用正交实验设计方法,对结果按照直观分析法进行分析,nsPEFs参数组合50ns,5kv,50Hz诱导早期细胞凋亡最少;nsPEFs的各参数的主次关系,脉宽>场强>频率。因此,50ns,5kv,50Hz为10-100ns脉冲宽度,5-15kv/cm场强的最优参数组合,可以此作为后续实验参数选择和设计的依据。3经过实验组和对照组对比,成骨样细胞株MG-63的细胞存活率具有显着的差异（p<0.05）。实验组细胞增殖曲线呈“V”型,4h时细胞增殖活性最低。4H后各时间点两两比较,存在统计学意义（p<0.05）,增殖活性开始升高。4结果显示,与对照组相比,实验组FAS的表达明显升高,存在明显的统计学差异（p<0.05）。4h-24h之间两两比较实验组Fas表达不存在统计学差异。24h后,Fas表达降低。5对比正常细胞形态,nsPEFs刺激后细胞体积减小,形状不规则,细胞核固缩或消失.
刘凤玲[6]（2008）在《电容耦合电刺激对体外人牙髓细胞增殖影响的研究》文中研究说明目的分离培养人牙髓细胞,探讨其基本的增殖、分化等生物学特性,通过利用电容耦合电刺激牙髓细胞,研究其对体外培养人牙髓细胞增殖的影响,以探索利用微电流环境在牙组织工程中应用的前景。方法从正畸减数拔除的年轻恒前磨牙中分离、培养牙髓细胞,传代三代至八代的细胞用于生物学特性试验研究:1、利用相差显微镜观察系细胞的一般形态. 2、记录细胞的生长曲线. 3、流式细胞术检测其表面分子的表达. 4、诱导矿化,通过免疫组化及逆转录-聚合酶链反应（Reverse transcription-polymerase chain reaction, RT-PCR）等鉴定其诱导分化的结果。在生物学研究的基础上,对体外培养的人牙髓细胞施加场强30V/cm ,频率分别为5、25、50、75、100KHz的电容耦合电刺激,30min/d,连续作用4d,观察不同频率电容耦合电刺激对人牙髓细胞体外增殖作用的影响,对照组正常状态培养,从以下方面检测电容耦合电刺激对人牙髓细胞增殖的影响: 1、倒置显微镜下观察细胞的形态改变. 2、MTT法检测细胞活性及增殖情况. 3、流式细胞仪测定细胞期。结果本实验中人牙髓细胞在体外可多次传代培养而保持旺盛的生长状态,其生长曲线在8-10天达到平稳,流式细胞术结果显示,CD44、CD90、CD147均为阳性,这与间充质干细胞的免疫表型相一致。经矿化诱导培养后,免疫组化结果显示牙本质涎蛋白染色阳性,茜素红染色有矿化结节形成以及碱磷酶表达升高,RT-PCR,DSPP表达阳性。经电容耦合电刺激后结果显示:1、不同频率的电刺激作用后细胞形态和对照组无明显差别。2、MTT检测显示经电容耦合电刺激后的人牙髓细胞增殖能力和对照组明显不同,其中50Hz刺激组生长曲线最高,明显快于其他频率刺激组（P<0.01）。3、流式细胞仪检测表明,经电容耦合电刺激作用以后,所有样本均未发现有DNA倍体异常的细胞（diploid:100%）;人牙髓细胞细胞周期发生了改变,S期细胞百分比和刺激频率有关。结论本实验从人年轻恒牙获得的人牙髓细胞易于分离培养,细胞状态较原始,具有干细胞特性,经诱导可分化为成牙本质细胞,提示其具有作为牙组织工程种子细胞的潜能。频率是影响电容耦合电刺激细胞生物学效应的重要因素之一,频率不同,其产生的促细胞增殖效应不一,50kHz可能是促进人牙髓细胞体外增殖的适合频率。
关志成,杨小卫,王黎明,张雅鸥,刘瑛岩[7]（2007）在《脉冲电磁场对骨质疏松的生物效应》文中指出电磁场作为非创伤性疗法在骨病治疗中已得到广泛的关注,故清华大学深圳研究生院以近10年的工作为基础,从细胞水平、动物模型和临床研究3个方面总结了脉冲电磁场应用于防治骨质疏松研究所取得的成果。研究发现,电磁场能够促进DNA的合成和影响成骨细胞的增殖和分化,且其效果存在一定的窗口效应;骨质疏松动物模型研究显示,脉冲电磁场能够改善去势诱导骨质疏松模型骨密度;初步临床实验证实了细胞研究和动物模型研究的作用效果,并且能够有效改善骨质疏松病人的疼痛和改善骨密度水平。因此认为脉冲电磁场将在骨质疏松的防治中发挥重要作用。
杨小卫,王黎明,关志成,张雅鸥,王向朋[8]（2007）在《脉冲电磁场预防骨质疏松模型的实验研究》文中研究指明为检验脉冲电磁场对去卵巢大鼠骨质疏松模型的预防效果,用30只质量180-220 g 3月龄雌性未孕SD大鼠去势建立骨质疏松模型,并随机分成正常对照组（SHAM）、去势对照组（OVX）、脉冲电磁场（PEMFs）组,每组10只,其中SHAM组作假手术,不切除卵巢,其余2组做双侧卵巢切除术;PEMFs组选用15 Hz脉冲电磁场,2 h/d,1次/d;SHAM组和OVX组不予任何处理,分别作为阳、阴性对照组,并用双能X射线骨密度仪检测腰椎和股骨骨密度。实验结果表明,脉冲电磁场照射后,校正骨密度低于正常对照组;与OVX组相比,脉冲电磁场照射后去势大鼠椎骨校正骨密度（16周时,P<0.001和24周时P<0.01）和股骨校正骨密度（16周时P<0.001和24周时P<0.01）提高,脉冲电磁场能改善去势大鼠骨质疏松具有预防作用,对脉冲电磁场应用于人体骨质疏松相关疾病的防治具有现实意义。
杨贞,沃兴德[9]（2006）在《磁生物学效应的研究进展》文中认为磁场作用于生物体后产生一系列的生物学效应,这种观点已被多年来的许多实验所证实。早在1896年,磁场对神经系统作用的研究就已被报道。后来,磁场抗炎,促进骨生成,促进血管神经再生等作用相继被发现。近几十年来,关于磁场对生物体的作用,从流行病学调查到实验室研究也都有了一定进展。如今,磁场的生物学效应研究已成为物理医学研究的热点。本文就近年来磁场生物学效应研究的热点与进展作一简要综述。
赵煜[10]（2006）在《磁性附着体模拟静磁场对成骨细胞生物学效应的基础研究》文中进行了进一步梳理脉冲电磁场（pulsed electromagnetic fields，PEMF）作为促进骨修复的一种方法已广泛应用于临床达20多年，其促进骨折愈合的疗效已得到国内外的证实。然而其作用机制是磁场效应占主导还是电场效应为主，直至目前尚未阐明。静磁场（static magnetic fields，SMF）做为一种良好的力源为修复体提供辅助固位和作为正畸矫治力矫治错合畸形，且体积小，无外设电源，便于长期局部应用，因而正被广泛应用于口腔修复和正畸领域。最近的研究表明静磁场能促进新骨形成、预防种植体植入导致的骨密度降低以及促进牙槽骨改建。然而有关静磁场对骨组织的生物学效应尚未取得一致结论，静磁场对成骨细胞（osteoblasts）增殖、分化以及代谢的影响和作用机制，尚鲜见研究报道。因此，有必要对磁性附着体静磁场对骨组织的影响作深入研究。 一．研究目的 本课题旨在通过模拟Magnetic 800磁性附着体静磁场，对体外培养的SD大鼠成骨细胞进行三种强度（12.5mT、125mT和250mT）、持续不同时间的静
二、Effects of Pulsed Electric Fields on DNA Synthesis in an Osteoblast-Like Cell Line (UMR-106)（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、Effects of Pulsed Electric Fields on DNA Synthesis in an Osteoblast-Like Cell Line (UMR-106)（论文提纲范文）
（1）钛基植入材料涂层的生物活性及其对口腔菌群遗传多样性的影响（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 第一章 绪论 |
| 1.1 引言 |
| 1.2 研究背景 |
| 1.2.1 钛及钛合金植入材料的特点 |
| 1.2.2 钛及钛合金植入材料的优缺点比较 |
| 1.2.3 钛及钛合金基材表面改性的研究与进展 |
| 1.2.3.1 钛及钛合金基材表面改性的技术 |
| 1.2.4 用于口腔医学领域植入体的特点与研究方向 |
| 1.2.5 抗菌材料在医学方面的应用 |
| 1.2.5.1 抗菌材料在临床医学中的应用 |
| 1.2.5.2 抗菌材料在口腔领域的临床应用 |
| 1.2.6 稀土族元素在生命科学领域的应用及前景 |
| 1.3 研究目的 |
| 1.4 研究意义 |
| 1.5 研究内容 |
| 1.5.1 载钇羟基磷灰石纯钛改性涂层的生物相容性与抗菌特性研究 |
| 1.5.2 掺钇二氧化钛微孔涂层的生物相容性与抗菌性能研究 |
| 第二章 载钇羟基磷灰石纯钛表面改性涂层的生物相容性与抗菌特性研究 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 材料与方法 |
| 2.2.1 实验材料 |
| 2.2.2 实验设计 |
| 2.3 结果 |
| 2.3.1 涂层表面形貌观察以及化学成分分析 |
| 2.3.1.1 基于AFM和 SEM样品的表面形貌与粗糙度分析 |
| 2.3.1.2 样品的水接触角(亲水性)结果分析 |
| 2.3.1.3 样品的XRD与 EDS结果分析 |
| 2.3.2 载钇羟基磷灰石纯钛表面改性涂层的体外相容性评价 |
| 2.3.2.1 样品对细胞增殖及细胞毒性影响 |
| 2.3.2.2 AO/EB染色观察HGF细胞铺展,爬附情况及形态变化 |
| 2.3.2.3 SEM观察细胞在样品表面铺展情况 |
| 2.3.2.4 AFM观察细胞在材料表面的微形貌及力学性质改变 |
| 2.3.2.5 ELISA检测在样品表面的HGF分泌的Col-1 水平 |
| 2.3.3 载钇羟基磷灰石纯钛表面改性涂层抗菌能力的评价 |
| 2.3.3.1 CCK-8法检测样品在改性材料的表面的抗菌能力 |
| 2.3.3.2 AO/EB染色观察材料的抗菌性能表现 |
| 2.3.4 载钇羟基磷灰石纯钛表面改性涂层对HGF细胞层纤连蛋白表达稳定性的影响 |
| 2.4 讨论 |
| 第三章 载钇二氧化钛涂层的生物相容性与抗菌性能研究 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 材料与方法 |
| 3.2.1 材料、仪器与方法 |
| 3.2.2 实验设计 |
| 3.2.3 样品制备及表征方法 |
| 3.3 结果 |
| 3.3.1 载钇二氧化钛涂层的体外相容性研究 |
| 3.3.1.1 CCK-8法检测成骨细胞增殖-毒性效应 |
| 3.3.1.2 吖啶橙染色观察MC3T3-E1细胞在样品表面的铺展、增殖情况 |
| 3.3.1.3 SEM观察MC3T3-E1 细胞在改性涂层表面的微形貌的改变 |
| 3.3.1.4 AFM观测MC3T3-E1 细胞在改性涂层表面的微形貌以及力学性质变化 |
| 3.3.1.5 F-actin标记的共聚焦显微镜观察改性涂层表面上HGF的细胞骨架形态学 |
| 3.3.1.6 茜素红染色定性观察材料表面MC3T3-E1矿化情况 |
| 3.3.1.7 ELISA法检测材料生长的MC3T3-E1 细胞上清液中ALP与 TGF-β的水平 |
| 3.3.1.8 WB检测材料表面MC3T3-E1 细胞中BMP-2 蛋白表达 |
| 3.3.2 载钇二氧化钛涂层的抗菌性能研究 |
| 3.3.2.1 CCK-8法测量金黄色葡萄球菌与大肠杆菌在改性材料表面增殖情况 |
| 3.3.2.2 AO/EB荧光染色观察材料表面细菌分布 |
| 3.3.2.3 SEM观察细菌在涂层表面的生长形态变化 |
| 3.4 讨论 |
| 第四章 载钇羟基磷灰石及二氧化钛涂层对口腔菌群遗传多样性影响的研究 |
| 4.1 引言 |
| 4.2 材料方法 |
| 4.2.1 材料与仪器 |
| 4.2.2 样品采集 |
| 4.2.3 实验设计及流程 |
| 4.3 结果 |
| 4.3.1 OTU聚类分析 |
| 4.3.2 菌群多样性分析 |
| 4.3.3 菌群差异度分析 |
| 4.4 讨论 |
| 第五章 载钇羟基磷灰石及二氧化钛涂层抗炎作用的研究 |
| 5.1 引言 |
| 5.2 材料与方法 |
| 5.2.1 钛丝复合材料的制备 |
| 5.2.2 斑马鱼材料植入模型建立及检测方法 |
| 5.2.3 统计学方法 |
| 5.3 结果 |
| 5.3.1 ELISA检测炎症因子表达量 |
| 5.3.2 组织形态观测 |
| 5.4 讨论 |
| 第六章 结论与研究展望 |
| 6.1 结论 |
| 6.2 研究展望 |
| 中英文缩略词表 |
| 参考文献 |
| 在学期间的研究成果 |
| 致谢 |
（2）人诱导性多能干细胞（iPSc）对人肺癌A549细胞裸鼠移植瘤生长、转移作用的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 第一章 前言 |
| 1.1 人iPS细胞简介 |
| 1.1.1 人iPS细胞的建立 |
| 1.1.2 iPS细胞技术的短期和长期应用 |
| 1.1.3 人iPS细胞作为细胞治疗剂 |
| 1.1.4 人iPS细胞治疗的安全性问题 |
| 1.2 A549细胞及人非小细胞肺癌治疗新方法简介 |
| 1.3 肿瘤干细胞简介 |
| 1.3.1 肿瘤的异质性与肿瘤干细胞概念的产生 |
| 1.3.2 癌症作为干细胞疾病 |
| 1.4 动物活体成像技术简介 |
| 1.4.1 动物活体成像技术的发展 |
| 1.4.2 光学成像技术简介 |
| 1.4.2.1 光学成像与非特异性成像剂 |
| 1.4.2.2 光学成像与受体特异性成像剂 |
| 1.4.2.3 光学成像中的其他成像剂 |
| 1.5 本论文研究的目的和意义 |
| 第二章 材料与方法 |
| 2.1 实验材料、试剂、仪器 |
| 2.1.1 实验材料 |
| 2.1.2 实验试剂 |
| 2.1.3 实验仪器 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.2.1 A549-RFP细胞的传代培养 |
| 2.2.2 A549-RFP细胞的冻存与复苏 |
| 2.2.3 人iPS细胞从有饲养层到无饲养层培养环境的过渡 |
| 2.2.4 人iPS细胞的无饲养层培养传代 |
| 2.2.5 人iPS细胞的冻存与复苏 |
| 2.2.6 裸鼠皮下细胞移植瘤模型的建立 |
| 2.2.7 裸鼠尾静脉注射肺转移模型建立 |
| 2.2.8 小动物活体荧光成像系统的使用 |
| 第三章 结果与分析 |
| 3.1 共培养的A549-RFP细胞和iPS-GFP细胞的形态特征及荧光观察 |
| 3.2 A549-RFP细胞和iPS-GFP细胞融合 |
| 3.2.1 A549-RFP细胞和iPS-GFP细胞的细胞融合仪电融合 |
| 3.2.2 A549-RFP细胞和iPS-GFP细胞的离心融合 |
| 3.3 裸鼠A549细胞和iPS细胞的移植瘤模型 |
| 3.3.1 肿瘤体积生长曲线 |
| 3.3.2 不同处理的裸鼠及剥离肿瘤比较 |
| 3.3.3 肿瘤组织荧光观察 |
| 3.4 活体荧光成像 |
| 3.4.1 裸鼠A549细胞和iPS细胞的移植瘤模型建立及肿瘤体积生长曲线 |
| 3.4.2 肿瘤动物模型的活体成像观察 |
| 3.4.3 活体成像系统检测A549细胞和ips细胞在裸鼠体内的的转移 |
| 3.4.3.1 成瘤11周裸鼠荧光蛋白表达的活体成像检测 |
| 3.4.3.2 成瘤12周裸鼠荧光蛋白表达的活体成像检测 |
| 3.4.3.3 成瘤14周裸鼠荧光蛋白表达的活体成像检测 |
| 3.4.3.4 肿瘤组织切片中的可能共表达GFP和RFP的细胞 |
| 3.5 裸鼠尾静脉注射肺转移模型建立 |
| 第四章 讨论 |
| 4.1 共培养的A549-RFP细胞和iPS-GFP细胞的形态特征的讨论 |
| 4.2 A549-RFP细胞和iPS-GFP细胞融合结果讨论 |
| 4.3 裸鼠A549细胞和iPS细胞的移植瘤模型的讨论 |
| 4.4 活体荧光成像观测移植瘤中A549细胞和iPS细胞转移讨论 |
| 第五章 总结 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
（3）基于磁场刺激的细胞生物效应机理研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 第一章 绪论 |
| 1.1 生物磁学 |
| 1.1.1 生物的磁特性 |
| 1.1.2 生物磁学的兴起和应用 |
| 1.1.3 磁刺激仪的发展与应用 |
| 1.1.4 磁刺激与电刺激的比较 |
| 1.1.5 常见磁场类型及参数 |
| 1.2 磁场刺激引发生物学效应的概述 |
| 1.2.1 磁场刺激对心肌机能的影响 |
| 1.2.2 磁场刺激对细胞生长的影响 |
| 1.2.3 磁场对细胞内遗传物质的影响 |
| 1.2.4 磁场对细胞膜离子通道电特性的影响 |
| 1.2.5 磁场刺激对细胞内生物大分子物质活性的影响 |
| 1.2.6 磁场对细胞形态结构和功能的影响 |
| 1.2.7 磁场对不同组织细胞的影响 |
| 1.3 影响磁刺激的生物效应的因素 |
| 1.3.1 磁场的物理特性 |
| 1.3.2 生物对象 |
| 1.4 本论文的研究目的和内容 |
| 1.5 本章小结 |
| 第二章 磁场刺激实验装置的研制 |
| 2.1 强脉冲磁场刺激器的研制 |
| 2.1.1 电路分析及感应电场的理论计算 |
| 2.1.2 感应电场的理论计算 |
| 2.1.3 磁场刺激器设计的电路原理和实现方案 |
| 2.1.4 磁场刺激器的各模块设计 |
| 2.1.5 磁场刺激器的实现 |
| 2.2 工频磁场刺激器的设计 |
| 2.2.1 工频磁场刺激器装置 |
| 2.2.2 实验磁场强度设计 |
| 2.3 心电信号放大装置的设计 |
| 2.3.1 前置放大器 |
| 2.3.2 主放大电路 |
| 2.3.3 低通滤波电路 |
| 2.3.4 陷波电路 |
| 2.3.5 心电信号放大装置测试 |
| 2.4 本章小结 |
| 第三章 LF-PMFs对心肌细胞机能的影响 |
| 3.1 心肌细胞的电生理机制 |
| 3.1.1 心动周期与心脏收缩的前后负荷 |
| 3.1.2 心肌细胞的类型 |
| 3.1.3 心肌细胞的跨膜离子运动与动作电位的关系 |
| 3.1.4 心肌细胞的机械收缩与动作电位的关系 |
| 3.1.5 心电图各波型与心肌动作电位的关系 |
| 3.2 磁刺激作用的基本原理 |
| 3.2.1 磁感生电场的作用原理 |
| 3.2.2 电复律的能量值 |
| 3.2.3 电磁场在人体内的衰减 |
| 3.2.4 磁场刺激的安全性 |
| 3.3 LF-PMFs对心肌收缩性的影响 |
| 3.3.1 实验材料和方法 |
| 3.3.2 实验结果 |
| 3.4 实验结果分析 |
| 3.5 本章小结 |
| 第四章 LF-PMFs对细胞增殖和凋亡的影响 |
| 4.1 基于LF-PMFs的细胞增殖检测 |
| 4.1.1 实验材料 |
| 4.1.2 细胞培养 |
| 4.1.3 工频磁场刺激 |
| 4.1.4 绘制细胞生长曲线 |
| 4.1.5 MTT比色实验 |
| 4.1.6 统计学分析 |
| 4.1.7 实验结果 |
| 4.2 基于LF-PMFs的细胞凋亡检测 |
| 4.2.1 实验材料 |
| 4.2.2 工频磁场刺激 |
| 4.2.3 DNA提取和琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡 |
| 4.2.4 流式细胞术分析细胞周期和细胞凋亡 |
| 4.2.5 实验结果 |
| 4.3 LF-PMFs对细胞增殖和凋亡的实验结果分析 |
| 4.4 本章小结 |
| 第五章 HPRT基因的生物信息学和LF-PMFs对其影响的研究 |
| 5.1 辐射易感基因HPRT基因的生物信息学研究 |
| 5.1.1 HPRT基因的辐射敏感性 |
| 5.1.2 HPRT基因的生物特性 |
| 5.1.3 生物信息学的研究概况 |
| 5.1.4 HPRT基因和蛋白序列检索 |
| 5.1.5 不同物种间HPRT cDNA和氨基酸序列比对 |
| 5.1.6 构建分子进化树 |
| 5.1.7 HPRT基因突变的检测方法 |
| 5.2 DNA的结构与特性 |
| 5.2.1 DNA遗传中心法则 |
| 5.2.2 DNA分子的空间结构 |
| 5.2.3 PCR技术 |
| 5.2.4 DNA测序原理 |
| 5.3 实验方法 |
| 5.3.1 实验材料 |
| 5.3.2 工频磁场刺激 |
| 5.3.3 HPRT基因提取 |
| 5.4 实验结果 |
| 5.4.1 PCR反应后凝胶电泳扫描图 |
| 5.4.2 DNA测序结果 |
| 5.4.3 HPRT基因序列分析 |
| 5.5 DNA测序结果分析 |
| 5.6 本章小结 |
| 第六章 人外周血淋巴细胞中端粒酶活性激活及其机制的研究 |
| 6.1 实验材料 |
| 6.1.1 实验细胞 |
| 6.1.2 实验试剂与耗材 |
| 6.2 实验方法 |
| 6.2.1 PBMC的体外刺激培养 |
| 6.2.2 细胞周期测定 |
| 6.2.3 TRAP方法检测端粒酶活性 |
| 6.2.4 Western blot检测 |
| 6.2.5 荧光定量PCR |
| 6.3 实验结果 |
| 6.3.1 细胞活化过程中的FCM检测 |
| 6.3.2 细胞活化过程中的端粒酶活性检测 |
| 6.3.3 细胞活化过程中端粒酶催化亚基(hTERT)表达水平的检测 |
| 6.3.4 细胞活化过程中hTERT mRNA水平的检测 |
| 6.4 分析讨论 |
| 6.5 本章小结 |
| 第七章 结论与展望 |
| 7.1 结论 |
| 7.2 展望 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读博士学位期间所发表的学术论文 |
（4）低强度脉冲电磁场影响大鼠成骨细胞的参数筛选（论文提纲范文）
| 缩略语表 |
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 文献回顾 |
| 一、低强度 PEMF 发生器的设计与制作 |
| 1.1 系统硬件基本介绍 |
| 1.2 系统软件基本介绍 |
| 1.3 系统整体测试 |
| 二、大鼠成骨细胞的提取、纯化和鉴定 |
| 2.1 材料 |
| 2.2 方法 |
| 2.3 结果 |
| 2.4 讨论 |
| 三、不同强度 PEMF 对大鼠成骨细胞的影响 |
| 3.1 材料 |
| 3.2 方法 |
| 3.3 结果 |
| 3.4 讨论 |
| 四、不同频率 PEMF 对大鼠成骨细胞的影响 |
| 4.1 材料 |
| 4.2 方法 |
| 4.3 结果 |
| 4.4 讨论 |
| 五、不同占空比 PEMF 对大鼠成骨细胞的影响 |
| 5.1 材料 |
| 5.2 方法 |
| 5.3 结果 |
| 5.4 讨论 |
| 六、不同波形电磁场对大鼠成骨细胞的影响 |
| 6.1 材料 |
| 6.2 方法 |
| 6.3 结果 |
| 6.4 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 个人简历和研究成果 |
| 致谢 |
（5）纳秒脉冲电场对成骨细胞影响的初步研究（论文提纲范文）
| 英汉缩略语名词对照 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 前言 |
| 论文一 纳秒脉冲电场对成骨细胞“窗口效应”的研究 |
| 1 实验材料和方法 |
| 2 实验结果 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 论文二 纳秒脉冲电场对成骨样细胞MG-63 的影响 |
| 前言 |
| 1 实验材料与方法 |
| 2 实验结果 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 全文总结 |
| 参考文献 |
| 文献综述 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读学位期间的研究成果及发表的学术论文 |
（6）电容耦合电刺激对体外人牙髓细胞增殖影响的研究（论文提纲范文）
| 一 中文摘要 |
| 二 英文摘要 |
| 三 前言 |
| 四 文献综述 |
| 五 材料与方法 |
| 六 结果 |
| 七 讨论 |
| 八 结论 |
| 九 参考文献 |
| 十 致谢 |
| 十一 缩略词 |
| 附图 |
（7）脉冲电磁场对骨质疏松的生物效应（论文提纲范文）
| 0 引 言 |
| 1 脉冲电磁场对分子和细胞的研究 |
| 1.1 影响细胞周期、增殖、分化和凋亡 |
| 1.2 对成骨细胞生长因子的作用 |
| 1.3 对骨基质合成的影响 |
| 1.4 对信号传递的影响 |
| 1.5 对破骨细胞的影响 |
| 1.6 对软骨细胞的影响 |
| 2 脉冲电磁场对动物模型的影响 |
| 3 脉冲电磁场照射的临床研究 |
| 4 电磁场作用物理机制的研究 |
| 4.1 电磁场细胞效应的物理作用机制 |
| 4.1.1 电场作用机制 |
| 4.1.2 磁场作用机制 |
| 4.2 细胞和分子水平的机制 |
| 5 结论与展望 |
（8）脉冲电磁场预防骨质疏松模型的实验研究（论文提纲范文）
| 0 引 言 |
| 1 骨质疏松模型和骨密度测定方法 |
| 1.1 骨质疏松动物模型与处理 |
| 1.2 骨密度测定 |
| 1.3 统计学数据分析处理 |
| 2 PEMFs骨质疏松治疗仪 |
| 3 结 果 |
| 3.1 质量变化 |
| 3.2 校正骨密度 |
| 4 讨 论 |
| 5 结 语 |
（10）磁性附着体模拟静磁场对成骨细胞生物学效应的基础研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 前言 |
| 第一部分 磁性附着体模拟静磁场对成骨细胞形态的影响 |
| 第二部分 磁性附着体模拟静磁场对成骨细胞增殖特性的影响 |
| 第三部分 磁性附着体模拟静磁场对成骨细胞分化功能的影响 |
| 第四部分 磁性附着体模拟静磁场对成骨细胞转化生长因子TGF-β1mRNA表达的影响 |
| 第五部分 磁性附着体模拟静磁场对成骨细胞立即早期基因c-jun表达的影响 |
| 全文总结 |
| 综述 |
| 个人简历 |
| 致谢 |
四、Effects of Pulsed Electric Fields on DNA Synthesis in an Osteoblast-Like Cell Line (UMR-106)（论文参考文献）
- [1]钛基植入材料涂层的生物活性及其对口腔菌群遗传多样性的影响[D]. 张凯亮. 兰州大学, 2020
- [2]人诱导性多能干细胞（iPSc）对人肺癌A549细胞裸鼠移植瘤生长、转移作用的研究[D]. 陈雷. 厦门大学, 2017(07)
- [3]基于磁场刺激的细胞生物效应机理研究[D]. 雷红玮. 东北大学, 2013(07)
- [4]低强度脉冲电磁场影响大鼠成骨细胞的参数筛选[D]. 李飞江. 第四军医大学, 2012(02)
- [5]纳秒脉冲电场对成骨细胞影响的初步研究[D]. 刘雯. 重庆医科大学, 2011(11)
- [6]电容耦合电刺激对体外人牙髓细胞增殖影响的研究[D]. 刘凤玲. 佳木斯大学, 2008(03)
- [7]脉冲电磁场对骨质疏松的生物效应[J]. 关志成,杨小卫,王黎明,张雅鸥,刘瑛岩. 高电压技术, 2007(02)
- [8]脉冲电磁场预防骨质疏松模型的实验研究[J]. 杨小卫,王黎明,关志成,张雅鸥,王向朋. 高电压技术, 2007(02)
- [9]磁生物学效应的研究进展[J]. 杨贞,沃兴德. 现代生物医学进展, 2006(09)
- [10]磁性附着体模拟静磁场对成骨细胞生物学效应的基础研究[D]. 赵煜. 四川大学, 2006(03)