一、禽类红核脊髓束的细胞构筑和机能—HRP和免疫组化结合法研究（论文文献综述）
毛小龙[1]（2018）在《黑曲霉ANSTJ01菌株安全性评价及鸡球虫EtMIC2外源蛋白表达》文中提出丝状真菌（Filamentous fungi）和大肠杆菌等原核表达系统和酵母相比,丝状真菌具有蛋白分泌能力强,同源蛋白胞外效率高、表达同源蛋白量大、表达蛋白具有天然活性高蛋白修饰翻译加工模式接近高等真核生物等一系列优点和优势。黑曲霉菌株被美国FDA和世界卫生组织认定为一般安全可靠无毒的（Generally regarded as safe,GRAS）微生物。作为细胞工厂,大量用于酶制剂制备、同源蛋白生产、有机酸生产、抗原生产等一些生产领域当中。不同菌株具有的产酶特性也有明显差别,本实验室分离得到的黑曲霉菌株ANSTJ01具有高产纤维素酶活性,能够降解赭曲霉毒素A。该菌株在畜牧业生产中的开发利用受到普遍的关注,但是对黑曲霉培养物的安全性研究报道比较少,为了保证人畜的安全需要对该菌株进行安全性评价。构建黑曲霉菌株为载体的外分泌及表面展示系统能在畜牧生产中对疫苗的研发提供了一个新的研究方向。本实验室在实验室分离得到黑曲霉ANSTJ01,在评价了该菌株的生物安全性基础上,构建了该菌株的EtMIC2蛋白的外分泌表达与表面展示系统,并对阳性菌株进行了发酵C源的优化。具体研究如下:1.黑曲霉ANSTJ01菌株的生物安全性评价为评价该菌株对雏鸡是否安全,以海兰褐雏鸡为试验对象,对黑曲霉培养物进行安全性评价。包括死亡率,血常规检测,组织切片,肠道检测等方面进行判定。该菌株在试验期内不能导致试验雏鸡死亡,血常规无异常,组织切片中未发现菌丝,肠道未导致病变。试验期内该菌株不能对海兰褐雏鸡产生致病性。2.黑曲霉外分泌及表面展示系统的构建及转染条件优化为筛选该菌株的筛选标记,将本实验室分离得到的黑曲霉菌株进行了抗生素筛选根据不同浓度,不同抗生素重复筛选技术。在YTD固体培养基下,30℃静态培养,实验结果显示200μg/m L潮霉素的效果最为明显可以作为遗传标记筛选。使用国际公认的黑曲霉强启动子PglaA（扩增于实验室分离得到的黑曲霉菌株）。将曲霉菌株的外分泌信号肽:GlaA singal,以及Hyg基因片段等与PglaA整合,成功构建目的质粒并命名为PPshD。将本实验保存并克隆于的EtMIC2基因,连入本实验室构建的PPSHD-GFP目的质粒中。得到阳性菌株并命名为PPSHD-GFP-EtMIC2。同时在EtMIC2基因片段前加入CBM锚定蛋白基因片段构建质粒PPSHD-CBM-EtMIC2。为提高原生质体产量,改变黑曲霉菌丝生长培养基及生长条件:培养12h在含有0.5%的玻璃纸培养基中;优化原生质体裂解酶系:使用配置混合酶系。大量提高黑曲霉原生质体产量。利用原生质体Ca2+转化技术,分别转染制备的瞬时质粒与同源重组线性化片段至黑曲霉菌株中,结果显示,瞬时质粒转化的阳性率达到83%,同源重组的转化效率达到48%,明显低于瞬时质粒转化效率,但是瞬时质粒阳性菌株为基因随机插入,而同源重组片段插入为定点插入。为增加目的蛋白的产量,通过改变碳源,改变发酵温度等条件成功优化了黑曲霉菌株发酵条件,增加了目的基因蛋白的表达量。其中48h时菌丝荧光强度麦芽糖发酵液的菌丝荧光>葡萄糖发酵液的荧光>纤维二糖发酵液>微晶纤维素发酵液。通过Western-blot检测及灰度值分析表明麦芽糖浓度10g/L中的发酵条件为最优。在本研究中,我们将EtMIC2基因成功克隆出并成功连入本实验室成功构建的PPshD-GFP及PPshD-CBM表达质粒中。构建黑曲霉外分泌质粒PPshD-GFP-MIC2及表面展示质粒PPshD-CBM-MIC2。将目的质粒通过AvrII限制性酶切酶将目的质粒线性化后,通过原生质体转染技术,将目的基因片段成功转染至黑曲霉菌体中,通过同源重组技术将目的基因重组至基因组中的固定位点。通过PCR技术筛选阳性菌株,通过荧光显微镜技术检测到目的基因成功表达。通过IFA检测表面展示的目蛋白,成功构建黑曲霉表面展示系统。后期通过改变发酵条件增加异源蛋白的表达产量,通过Western-blot技术成功验证目的蛋白的表达量提高。
魏丽娜[2]（2011）在《不同频率电针对山羊痛阈和中枢P物质表达水平的影响》文中提出P物质属于速激肽家族成员,在哺乳动物神经系统中可能作为一种神经递质或调质。P物质在痛觉调制方面具有双重作用,在脊髓中作为神经递质传递“痛”信号,而在脑内其具有镇痛效应。P物质在皮质下区含量最高,如黑质、丘脑前部、苍白球、尾核和PAG。用放免和免疫组化法发现P物质在中脑、下丘脑和视前区有较高的表达,而在小脑的表达量较低。低频电针刺激P物质增加比高频多,电针刺激能引起大鼠尾壳核、下丘脑室旁核、下丘脑视前区、杏仁核、PAG表达的增加,但是在脊髓背角,15 Hz是最佳频率,可以引起P物质表达的增加。P物质在脑内有广泛的分布,其在镇痛机制中可能扮演着重要的角色。然而,兽医工作者经验表明,反刍动物的最佳镇痛频率范围为30-300 Hz,而小实验动物的最佳镇痛频率为2-15 Hz,是否反刍动物针刺镇痛机制和小实验动物有差异,具体有什么样的差异,目前尚不清楚。以往的针刺镇痛实验主要是针对小实验动物和人的,而对反刍动物针刺镇痛机制研究较少。本实验主要是研究不同频率电针对山羊脑内P物质表达和分布的影响,初步阐明P物质参与山羊高频针刺镇痛的作用机理,为反刍针刺镇痛在兽医临床上的运用提供理论支持。本实验选取健康成年杂交山羊35只,体重25±2kg,随机分为5组,分别为对照组、2 Hz、40 Hz、60 Hz和100 Hz电针组。固定好山羊后,电针组采用“耳根-三阳络”、“百会-鬐甲”两组组穴,电针刺激30 min,电针前和电针后分别采用经典的钾离子透入法测定山羊的痛阂。电针刺激结束后,麻醉山羊,灌流固定取脑,制作石蜡切片,采用SABC免疫组化法观察各组山羊脑内P物质在镇痛相关核团和组织内（隔区、尾核、视上核、下丘脑室旁核、下丘脑腹内侧核、杏仁核、PAG、红核、蓝斑、臂旁核、中缝大核、孤束核、巨细胞网状核、脊髓背角）的表达情况。实验结果表明60 Hz电针组山羊的痛闽电针前后痛阂上升了84%,40 Hz和100 Hz电针组分别上升了51%和54%,2 Hz组上升了35%,60 Hz电针组痛阈升高与其他电针组相比差异极显着（P<0.01）；其次为40 Hz电针组和100 Hz电针组,但这两组痛阈升高无显着性差异（P>0.05）。SABC免疫组化结果表明,隔区、尾核、视上核、下丘脑室旁核、杏仁核、PAG、红核、蓝斑、臂旁核、中缝大核、巨细胞网状核、孤束核和脊髓背角的电针组P物质表达量均高于对照组。40 Hz、60 Hz和100 Hz高频电针P物质在隔区,PAG、红核、臂旁核的表达量高于2 Hz电针组,其中隔区、红核、臂旁核表达量显着高于2 Hz（P<0.05）。电针频率为60 Hz时,P物质在尾核、视上核、杏仁核、中缝大核、巨细胞网状核表达量最高,显着高于其他电针组。电针频率为40 Hz时,下丘脑腹内侧核和脊髓背角表达量最高,与其他电针组比较差异显着（P<0.05）。电针频率为100 Hz,下丘脑室旁核的表达量最高,显着高于其他电针组（P<0.05）。电针为2 Hz时,蓝斑和孤束核的表达量最高。
兰晓宇[3]（2010）在《不同强度光照对母鸡中脑和间脑c-fos基因表达的影响》文中研究表明c-fos基因是即早基因家族中最重要成员之一,普遍存在于中枢神经细胞中,正常情况下表达水平很低,难以检测,多种刺激因素可诱导该基因迅速的一过性表达,由此可以描绘出一个参与该信息传递过程的中枢通路,并可获得脑部相应功能活动数据。本研究采用c-fos法观察了母鸡脑部对不同强度光照的反应。将150日龄母鸡右眼遮光7天后接受不同强度（10Lux、20Lux、30Lux和40Lux）的光照刺激1.5h,暗适应1.5h后灌流固定,取脑制作石蜡切片,采用免疫组化和原位杂交方法检测c-fos基因在中脑和间脑的表达。同时采用Western blot技术检测Fos蛋白的存在。根据c-fos基因表达出现的方式、部位和数量,分析鸡脑参与光信息传递过程的中枢通路,为进一步闸明鸟类视觉形成机理提供有价值的资料;由Fos蛋白在不同光照强度下对母鸡表达的不同,判断母鸡脑对不同强度光线刺激引起的反应,探究光照对母鸡生产性能的影响机制,为养鸡业科学利用光照提供理论依据。同时应用免疫组化方法检测了促性腺激素释放激素（GnRH）免疫反应阳性神经元在中脑和间脑的分布,通过其与c-fos基因表达产物在神经元内的关系,探讨母鸡脑内光照刺激与生殖活动间内在联系。结果显示:免疫组化方法检测到母鸡的间脑和中脑内有大量Fos样免疫反应阳性神经元,主要见于左侧,分布于视顶盖中央灰质层（SGC）,圆核（ROT）,外侧膝状腹侧核（ Glv）,半月核（SLu）,峡核大细胞部（Imc）,狭核小细胞部（Ipc） ,室旁核（PVN）,弓状核（ARC）,动眼神经核（OMv）。阳性细胞计数与对照组相比较差异显着（p<0.010）;不同强度光照诱导母鸡c-fos基因的表达不同,在SGC ,ROT,SLu,Imc ,Ipc,Glv,20Lux,30Lux组的表达较对照组明显增加,40Lux组次之,10Lux组最低;PVN,ARC为20Lux组表达最强, 30Lux,40Lux组逐渐减弱;而OMv的表达随着强度的增加而加强;原位杂交方法检测到母鸡的间脑和中脑内有大量Fos样阳性神经元,主要见于左侧,分布于视顶盖中央灰质层（SGC）,圆核（ROT）,外侧膝状腹侧核（ Glv）,半月核（SLu）,峡核大细胞部（Imc）,峡核小细胞部（Ipc） ,室旁核（PVN）,弓状核（ARC）。并且蛋白印迹法（western blot）检测的结果显示,49kD到90kD间有明显特异条带,即Fos蛋白条带,证明在母鸡脑蛋白提取液中有Fos蛋白存在。GnRH在中央灰质层（SGC）,圆核（ROT）,室旁核（PVN）,弓状核（ARC）均有表达。表明鸡的离顶盖通路不仅是视觉信息加工的主要通路,而且对光照刺激的反应亦较敏感;离顶盖通路的一个侧支顶盖—峡核回路也参与光信息的传递与加工;母鸡对不同强度光照有不同的反应;光照刺激可能通过影响光信息通路中神经核团的GnRH分泌与含量对母鸡生殖功能起调节作用。
郝建军[4]（2010）在《妊娠期大鼠子宫中5-HT和VIP及其受体的表达》文中研究指明哺乳动物的妊娠过程是一个复杂的过程,涉及到胚胎的着床、胎儿的生长发育,以及与之相适应的母体子宫的组织结构和生理的变化。妊娠期子宫的生理性变化,是受神经、免疫、内分泌系统的调节而发生相应的变化,三者既相互协同又相互制约。本试验采用超敏感的免疫组织化学SP法和图像分析法对妊娠各期（胚胎植入前期、植入期、植入后期、妊娠中期和妊娠晚期）及产后SD大鼠子宫组织中5-HT、5-HT1A受体、VIP和VIP2受体的分布情况、变化规律及表达的相关性进行了研究。为进一步揭示其在子宫中的生理功能提供有益的形态学价值。主要结果如下:1.5-HT及5-HT1A受体免疫阳性产物广泛存在于子宫内膜上皮细胞、子宫腺细胞、血管内皮细胞、血管平滑肌细胞、子宫螺旋动脉、基质细胞、蜕膜细胞、免疫细胞及肌纤维中。5-HT在子宫内膜中的表达,植入后期和妊娠中期着色最深,妊娠晚期、植入期、植入前期和产后着色依次减弱;子宫肌层中,5-HT的着色趋势与内膜层基本一样。5-HT1A受体在妊娠期子宫中的表达变化,植入前期、植入期和植入后期着色依次增强,到妊娠中期着色最深,而后着色又减弱。5-HT和5-HT1A受体在妊娠期子宫中的表达具有一定规律,提示5-HT和5-HT1A受体参与妊娠的调节。2.VIP和VIP2受体免疫阳性产物广泛存在于子宫内膜上皮细胞、子宫腺细胞、子宫螺旋动脉、血管内皮细胞、血管平滑肌细胞、基质细胞、蜕膜细胞、免疫细胞及肌纤维中。VIP在子宫内膜中的表达,妊娠中期和妊娠晚期着色最深,植入后期中等强度着色,而其它各期着色都较浅;子宫肌层中,妊娠中期着色最深,妊娠晚期次之,其它各期着色都较浅。VIP2受体在妊娠期子宫中的表达变化。子宫内膜中,妊娠中期和植入后期着色最深,植入前期、妊娠晚期、产后和植入期着色依次减弱;子宫肌层中,妊娠中期着色最深,妊娠晚期和植入后期次之,植入前期和产后着色较浅,植入期着色最浅。VIP和VIP2受体在妊娠期子宫中的表达具有一定规律,提示VIP和VIP2受体参与妊娠的调节。3.5-HT和5-HT1A受体在妊娠各个阶段子宫中的表达具有极显着正相关性;VIP和VIP2受体在妊娠各个阶段子宫中的表达,具有正相关性;VIP和5-HT在妊娠各个阶段表达也存在正相关性,说明VIP和5-HT对子宫的调控具有协调性。
罗厚强[5]（2009）在《鸵鸟小脑的形态学及GABA在其小脑内分布研究》文中研究说明小脑是调节躯体运动的高级中枢,在维持肌紧张、身体平衡、协调随意运动方面起着重要的作用,此外,小脑与运动性的学习记忆和心血管活动也有一定的关系。γ-氨基丁酸（γ-Aminobutyric acide,GABA）是一种非蛋白质天然氨基酸,它是中枢神经系统中最重要的抑制性神经递质,具有降低血压,改善脑机能、抗惊厥、预防和治疗癫痫、活化肾肝、促进精子受精等功能。小脑中的Purkinje细胞是小脑皮质中唯一的传出纤维,其神经递质就是GABA,而GABA作为中枢神经系统一种重要的抑制性神经递质,参与了40%以上的抑制性神经介导,它在许多生理活动中发挥着重要作用。有关哺乳动物的GABA,已经做了大量研究,而对禽类的GABA也有零星资料,但是对非洲鸵鸟是否存在GABA,其结构和作用与其它动物的有何异同,至今尚未见过报道。因此,本研究以非洲雏鸵鸟为试验动物,对其小脑进行了形态学研究,并利用HE染色方法、Nissl染色方法及SABC法,研究GABA免疫阳性神经元在不同年龄段鸵鸟小脑中的分布与其它家禽小脑内GABA免疫阳性神经元分布的比较,主要研究工作和结果如下:1非洲鸵鸟小脑的形态学研究为了探明非洲鸵鸟小脑的形态学结构,本研究选用成年非洲鸵鸟6羽,雌雄各半,经跖静脉注射20%的乌拉坦（1g/kg体重）深度麻醉,颈动脉放血致死,开颅取小脑,固定完全后制成切片,明视野显微镜观察各神经核团的位置、形态及细胞构筑。结果显示:非洲鸵鸟小脑正中矢状切面为近似椭圆形,其分层与北京鸭、乌鸡和鸽子的相同,由外向内依次为分子层、蒲肯野细胞层和颗粒层。分子层主要位于皮质浅层,较厚,神经元较少。蒲肯野细胞层位于分子层深部,主要是由一些排列规则,胞体较大的蒲肯野氏细胞组成,细胞呈梨形、圆形或椭圆形,蒲肯野氏细胞的直径为27.5-37.5μm之间。位于小脑皮质最深部的颗粒层,密集排列的颗粒细胞和少量的高尔基细胞组成。笔者通过观察发现非洲鸵鸟小脑内侧核的细胞构筑与北京鸭、鸽子等家禽的大体相似。但非洲鸵鸟的小脑内侧核内神经元数量很多,细胞排列松散,核团吻尾径比北京鸭的长,这表明非洲鸵鸟此核团较发达。2雏鸵鸟小脑的发育规律及GABA表达与年龄的相关性为了探明GABA阳性神经元在非洲雏鸵鸟小脑的分布,本试验以1 d、45 d、90 d雏鸵鸟为对象,利用Nissl染色显示小脑皮质结构和SABC标记GABA阳性神经元。结果显示:神经元胞体、主树突、胞核及其核仁清晰可见,胞质中蓝紫色或浅蓝色尼氏小体成细颗粒状或斑块状堆积,细胞形态大小各异。不同日龄的雏鸵鸟小脑皮质各层中均可见GABA免疫阳性神经元、阳性纤维和阳性斑点,免疫阳性反应呈棕黄色或黄褐色,45d雏鸵鸟的GABA免疫阳性神经元在三个阶段之中阳性表达最强的。说明蒲肯野细胞此时合成GABA最多,推测45d左右可能是雏鸵鸟生长发育速度达到最高峰,45d是整个育雏阶段极为重要的时期。3 GABA免疫阳性神经元在鸵鸟和其他家禽小脑内分布的比较研究为了探明GABA阳性神经元不同动物的小脑的定位和分布,本试验以成年健康非洲鸵鸟、三黄鸡、皖西白鹅各6羽,采用免疫组化ABC法标记GABA阳性神经元。结果显示:非洲鸵鸟小脑皮质各层中均可见GABA免疫阳性神经元、阳性纤维和阳性斑点。GABA免疫反应产物呈褐色,呈颗粒状或点状,部分神经元出现不同强度的GABA免疫反应产物,在少数区域出现免疫反应阳性纤维和终末。GABA免疫阳性神经元不仅存在于非洲鸵鸟的小脑皮质分子层中星形细胞和篮状细胞中,蒲肯野细胞层及高尔基细胞及小脑内侧核中有大量的表达,而且还存在于三黄鸡和皖西白鹅的小脑皮质各层之中。在小脑中央核和蒲肯野细胞层中,与三黄鸡、皖西白鹅相比,非洲鸵鸟GABA免疫阳性产物的积分光度值、阳性单位、平均灰度值差异性极显着。这表明GABA免疫阳性反应物在非洲鸵鸟小脑皮质的表达是最强的,可能是鸵鸟小脑蒲肯野细胞分泌较多的GABA及GABA还可能参与了小脑中央核的有关活动,共同调节小脑精细功能。
潘堂峰[6]（2007）在《摩杂一代水牛与广西本地水牛下丘脑神经核团形态学及细胞构筑比较研究》文中认为应用石蜡切片分别作HE、NISSL染色，采用德国莱卡公司DMRX AQ550JMS型显微镜及其图象分析系统扫描水牛下丘脑切片。以LEICQWIN图象分析软件对细胞数密度、胞体平均面积、胞体周长、胞核面积、胞核周长、各型细胞的出现率进行研究。结果显示：1．视交叉上核：摩杂一代水牛（以下称杂交水牛）细胞密度、胞体面积与本地水牛相比差异显着，杂交水牛细胞密度较大，胞体面积较小，中、小型细胞占大多数。在此核，水牛细胞核以大核、中核占多数。2．前核：杂交水牛此核的细胞密度与本地水牛相差不大，但胞体平均面积明显大于本地水牛（P＜0.01）。两种水牛在此核均以中、小型细胞为主，杂交水牛中型细胞明显少于本地水牛，巨型细胞显着多于本地水牛（P＜0.01）。3．视前区：杂交水牛巨型、中型、小型细胞在此核占大多数（90.71％），本地水牛以中、小型细胞为主（81.29％），杂交水牛巨型细胞显着多于本地水牛（P＜0.01）。巨型核细胞在两种水牛的出现率基本一致。4．室旁核：两种水牛此核的细胞密度差别不大，杂交水牛胞体面积明显大于本地水牛（P＜0.05）。杂交水牛巨型、大型细胞明显多于本地水牛（P＜0.01）。5．背内侧核：杂交水牛此核细胞密度明显少于本地水牛（P＜0.05），胞体面积、周长均明显大于本地水牛（P＜0.05）。两种水牛在此核以中、小型细胞占大多数，达到八成以上。6．后核：杂交水牛此核胞体面积、周长明显大于本地水牛。杂交水牛在此核主要为中、小型细胞居多（80.47％），而本地水牛以小型细胞占大多数（75.34％）。各型细胞在两种水牛的出现率均为极显着（P＜0.01）。7．腹内侧核：杂交水牛此核细胞密度小于本地水牛，胞体面积明显大于本地水牛。杂交水牛此核主要是中、小型细胞占多数，本地水牛此核小型细胞占大多数（69.88％）。8．乳头体：杂交水牛乳头体细胞密度胞体面积明显大于本地水牛。大型、巨型细胞在两种水牛中的出现率差异极显着（P＜0.01）。本地水牛巨型细胞出现率为（4.88％）明显少于杂交水牛（17.59％）。本地水牛巨型核所占比例较多（69.64％），明显高于杂交水牛（25.93％）。9．弓状核：两种水牛细胞密度较小。杂交水牛巨型、大型细胞出现率显着高于本地水牛（P＜0.01）。杂交水牛胞体面积明显大于本地水牛。中型核、巨型核细胞在两种水牛的出现率差异显着（P＜0.05）。
蒋田园[7]（2007）在《奶山羊黄体弥散性神经内分泌细胞标志物的表达特点》文中认为为了研究山羊卵巢中是否存在弥散性神经内分泌系统（DNES）细胞及其分布情况,采用了敏感性较高的免疫组化链霉素抗生物素蛋白-过氧化物酶法、超微结构观察及计算机图象分析等方法对妊娠中期奶山羊卵巢黄体中弥散性神经内分泌细胞标志物的分布进行了研究。结果显示:一些黄体细胞胞质中含有5-羟色胺（5-HT）、S-100蛋白、神经特异性烯醇化酶（NSE）、突触素（SYP）免疫反应阳性物质。神经特异性烯醇化酶（NSE）、突触素（SYP）、5-羟色胺（5-HT）、S-100蛋白均为弥散性神经内分泌系统光谱的,共同的细胞标记物。根据免疫反应复合物呈色的程度不同可分为强阳性、中等阳性、弱阳性三种。这些细胞散在或成团分布,多呈圆形、卵圆形或三角形,一些细胞具有明显的突起。在电镜下观察,一些细胞含有分泌颗粒,分泌颗粒散在分布于胞浆内,它们形态不一、大小不等,直径约100-500nm,有的细胞内的颗粒含有明显的核心和晕轮,上述结果表明,山羊卵巢黄体中的这些细胞属DNES细胞。山羊黄体中DNES细胞所含的S-100蛋白、5-HT、NSE和SYP在非黄体细胞中未检测到。结果提示:这些物质与黄体的形成及退化有极为密切的关系为了探讨5-羟色胺（5-HT）、S-100蛋白、神经特异性烯醇化酶（NSE）和突触素（SYP）四种弥散性神经内分泌细胞标志物是否在黄体的同一细胞中共存,本实验采用免疫荧光双标记法结合激光扫描共聚焦显微镜观察对四种弥散性神经内分泌细胞标志物的分布进行了检测。结果显示:在妊娠中期奶山羊卵巢黄体细胞中,首次观察到了S-100蛋白和SYP有共同存在于一个细胞的现象。且SYP和S-100蛋白共存的细胞主要分布在黄体周边,少数散布于中央区域。S-100与5-HT和5-HT与SYP共存的细胞均匀分布于整个黄体中。阳性反应主要出现于大黄体细胞,但在黄体被膜下方及小梁两侧等小黄体细胞聚集区域也可见一定数量的阳性细胞。在激光扫描共聚焦显微镜下观察,可看到细胞背景色为黑色,单标记阳性反应的组织细胞胞质为深浅不等的红色或绿色,双阳性细胞胞质为深浅不等的黄色。S-100蛋白与NSE、S-100与5-HT、S-100与SYP、NSE与5-HT、NSE与SYP、5-HT与SYP免疫阳性细胞轮廓清楚,胞质中含有深浅不等黄色的染色颗粒,细胞核不着色,呈圆形点状,核位于细胞中央或偏于一侧。细胞形态有圆形、卵圆形、长梭形、三角形等。结果提示:属于弥散性神经内分泌细胞的黄体细胞,必然存在不同的类型,它们分泌的产物和行驶的功能不同。
樊均德[8]（2007）在《齐口裂腹鱼消化道及脑中六种脑肠肽的免疫组织化学研究》文中研究说明方法与目的：本研究运用常规解剖、组织学和免疫组织化学方法对六种脑肠肽在齐口裂腹鱼消化道及脑中进行定位研究，以探讨这些肽类物质在该鱼消化道和脑的分布规律和生理功能，为该鱼的养殖、消化和神经生理提供参考，同时丰富鱼类组织学、生理学、神经内分泌学等的研究资料。结果：β-内啡肽（β-endorphin，β-EP）细胞在前肠分布密度最高，中肠次之；中脑、间脑和小脑有阳性细胞和纤维。胃泌素（Gastrin，Gas）细胞仅前肠有少量分布；端脑、间脑、中脑、小脑和延脑存在阳性细胞和纤维。神经肽Y（Neuropeptide Y，NPY）细胞在前肠密度最高，中肠次之；仅端脑和间脑可见阳性细胞。生长抑素（Somatostatin，Som）细胞密度在前肠最高，中肠次之，后肠最低；端脑、间脑、中脑、小脑和延脑有阳性细胞和纤维。血管活性肠肽（Vasoactive intestinal polypeptide，VIP）细胞仅前肠有少量分布；端脑、间脑、中脑和小脑存在阳性细胞和纤维。5-羟色胺（5-hydroxytryptamine，5-HT）细胞密度在前肠最高，中肠次之，后肠最低；端脑、间脑、中脑、小脑和延脑有阳性细胞和纤维。结论：六种脑肠肽在齐口裂腹鱼消化道和脑中均有分布，其分布特点各异，与其它鱼类消化道及脑中的分布也有较大差异。这些肽类物质在消化道中的分布型与该鱼的食性和消化道结构相关，抑制性与刺激性因子在分布上有一定对应性，它们共同参与消化功能的协调。该鱼脑中脑肠肽的广泛分布，说明它们在中枢水平参与鱼类许多生理机能的调控，具有重要的生理作用。
张春雷[9]（2007）在《黄牛能量平衡调控候选基因遗传变异及其与生长性状相关分析》文中提出本研究采用PCR-RFLP、PCR-SSCP和DNA测序技术,检测了南阳牛、秦川牛、郏县红牛、晋南牛、鲁西牛、安格斯牛、中国荷斯坦牛7个群体共671个个体的8个与能量平衡调控相关基因（AGRP、POMC、CART、MC3R、MC4R、Ghrelin、HTR1B和HTR2A）的遗传变异,分析了其遗传结构和遗传多样性,并对南阳牛、秦川牛和郏县红牛3个群体在上述基因位点的多态性与其生长性状进行了相关分析,以检验这些基因的多态对3个黄牛群体生长发育的遗传效应,以期发现对重要经济性状具有显着效应的遗传标记,为中国黄牛的高效选育和分子标记数据库的建立、种质资源保存与利用提供遗传学依据。本研究获得了以下结果:1. AGRP基因多态性及其与南阳牛、秦川牛生长性状的相关分析共研究了7个群体AGRP基因3个基因座。3’侧翼区新发现2个SNP（603243 C>T和603093 C>T,与NW929325对照）,其中一个T>C的突变导致该位置出现1个MspI酶切位点。黄牛AGRP基因与水牛序列的同源性为96%。基因型分布的卡方独立性检验显示,奶牛与地方黄牛和安格斯牛差异极显着（P<0.001）。外显子上未检测到多态。MspI酶切多态性与南阳牛、秦川牛、郏县红牛生长性状的相关分析表明,MspI酶切多态性对南阳牛生长性状无显着影响（P>0.05）。秦川牛群体中有突变等位基因的个体体重、体高显着大于野生型个体（P<0.05）。2. POMC基因多态性及其与南阳牛、秦川牛和郏县红牛生长性状的相关分析POMC基因5个基因座中,在3’侧翼区P5基因座新发现3个SNP（811845 C>T、811821 T>C和811797 A>G,与NW928357对照）。各群体这2个SNP的多态信息含量在0.25～0.50之间,属于中度多态。基因型分布的卡方独立性检验显示,奶牛与南阳牛、郏县红牛差异极显着（P<0.01）。未检测到外显子上多态。POMC基因3’侧翼区多态位点与南阳牛6月龄体重和0～6月龄平均日增重显着相关,BB型个体显着大于AA型（P<0.05）。秦川牛AB型个体体重、十字部高、胸围显着大于AA型,郏县红牛BB型个体体高、胸围、腰角宽显着大于AA型（P<0.05）。3. CART基因多态性及其与南阳牛、秦川牛生长性状的相关分析7个群体CART基因4个基因座上首次检测到9个SNP（329037 T>C、329004 T>C、328914 T>C、328899 T>C、329668 A>G、330141 G>C、330216 G>A、330854 C>G和330852 C>T,与NW929854对照）,全部位于非编码区。基因型分布卡方独立性检验显示,奶牛与地方黄牛存在显着差异（P<0.05）。除329668 A>G位点,各群体SNP的PIC均小于0.25,说明该基因保守。CART基因各多态基因座与南阳牛18和24月龄体重、18月龄体斜长显着相关（P<0.05）,其中C1和C4基因座AA型个体显着大于AB型,而C2和C3基因座中AA型个体显着小于AB和BB型。秦川牛群体中,C1基因座AA型个体体重和体斜长显着大于AB型,C2基因座AA型个体十字部高显着小于BB型,C3基因座AA型个体腰角宽显着大于AB和BB型,C4基因座AA型个体腰角宽显着小于BB型（P<0.05）。4. MC3R基因多态性及其与南阳牛、秦川牛生长性状的相关分析7个群体MC3R基因3个基因座中首次检测到10个SNP（1986929 T>G、1986830 C>T、1986764 T>C、1986395 T>C、1986353 T>C、1986342 C>T、1986227 T>C、1986167 G>A、1985897 G>A和1985724 C>T,与NW001502669对照）,其中1986342 C>T突变导致MC3R蛋白183S>F氨基酸突变。本基因MC3R1基因座各群体内均处在Hardy-Weinberg非平衡状态,多态信息含量大于0.5,多态性丰富。MC3R1基因座与南阳牛18月龄体斜长、胸围,24月龄体重、体高显着相关,突变型个体显着高于野生型（P<0.05）。MC3R3基因座与南阳牛12月龄体重和胸围,18月龄体重、胸围和13-18月龄平均日增重,24月龄体重和体斜长均显着相关,突变型个体显着高于野生型（P<0.05）。秦川牛群体中,MC3R1基因座突变型个体体重、体斜长和胸围显着大于野生型,MC3R2基因座杂合型个体体重和胸围大于纯合型,MC3R3基因座AB型个体体重和十字部高显着大于AA和AC型（P<0.05）。5. MC4R基因多态性及其与南阳牛、秦川牛和郏县红牛生长性状的相关分析7个群体MC4R基因5个基因座中共检测到6个SNP（109021 C>T、109163 C>G、110279 C>G、110209 A>T、110210 T>G和110147 A>G,与NW930353对照）,其中后4个为新发现的,位于5’侧翼区。本研究共检测4种SNP组合单倍型,秦川牛和南阳牛群体中检测到4种单倍型,郏县红牛没有检测到单倍型00,荷斯坦奶牛群体中没有检测到单倍型00和01,安格斯牛群体中只检测到单倍型11。MC4R4基因座与南阳牛12月龄体重、体斜长、7-12月龄平均日增重,18月龄体重、体斜长、13-18月龄平均日增重,24月龄体重、坐骨端宽、19-24月龄平均日增重显着相关,突变型个体小于野生型个体（P<0.05）。南阳牛MC4R5基因座突变个体体重和胸围显着小于野生型（P<0.05）。MC4R4基因座与秦川牛、郏县红牛体重和体斜长显着相关,BB型个体显着大于AA型（P<0.05）。郏县红牛MC4R5基因座AA型个体体重和体斜长显着大于BB型（P<0.05）。6. Ghrelin基因多态性及其与南阳牛、秦川牛和郏县红牛生长性状的相关分析7个群体Ghrelin基因4个基因座中共首次检测到1处突变403725 T>C （与NW001494127）。卡方检验显示,郏县红牛和晋南牛处于Hardy-Weinberg非平衡状态,其余不平衡。南阳牛403725 T>C位点BB型个体24月龄体重、坐骨端宽显着大于AA型,秦川牛该位点BB型个体体重和胸围显着大于AA型,郏县红牛BB型个体体重显着显着大于AA型（P<0.05）。7. HTR1B基因多态性7个群体HTR1B基因4个基因座中共首次检测到6个SNP（205 G>T、507 C>T、546 C>G、744 C>T、816 G>A和942 G>A,与XM583895对照）,其中205 G>T导致69位Ala突变为Ser。各遗传群体内205 G>T、744 C>T、816 G>A和942 G>A位点均处于Hardy-Weinberg平衡,而507 C>T和546 C>G位点只有鲁西牛处于Hardy-Weinberg平衡。奶牛205T等位基因频率显着高于其他肉牛品种（χ2 = 6.87）。奶牛205 G>T位点多态信息含量为0.25,其余各位点在不同群体内均小于0.10,说明牛HTR1B基因较保守。
栗卓[10]（2007）在《大鼠红核脊髓束损伤模型的建立及雌激素对红核神经元保护作用的实验研究》文中研究指明第一部分神经示踪技术观察大鼠红核脊髓束的定位目的:观察红核脊髓束的起源及在脊髓中的定位。方法:采用生物素化葡聚糖胺（biotinylated dextran amine, BDA）顺行示踪和Fluoro-Ruby（FR）逆行示踪法。结果:BDA阳性棕黄色的红核脊髓束主要起于红核的大细胞,离开红核后立即经中脑中缝的腹侧被盖交叉至对侧,形成红核脊髓束,行于脊髓白质外侧索的背侧、脊髓灰质后角的外侧,密集排列成独立的纤维束,下行可达颈、腰部的膨大。FR阳性反应产物在颈段脊髓外侧索的背侧定位,逆行至中脑红核中,红核中可见到大量红色阳性标记细胞。结论:运用BDA顺行神经示踪剂和FR逆行荧光示踪剂可以清晰对正常大鼠红核脊髓束进行精确解剖定位,为进一步研究红核脊髓束的损伤和功能重建提供形态学基础。第二部分大鼠红核脊髓束损伤模型的建立与评价目的:成功制作大鼠单侧红核脊髓束损伤模型。方法:选择性切割大鼠颈段红核脊髓束,建立大鼠单侧红核脊髓束损伤模型,采用前肢支撑探测实验进行行为学检测,运用生物素化葡聚糖胺（BDA）顺行神经示踪法,Fluoro-Ruby逆行荧光标记神经示踪法和NADPH-d组织化学法对模型进行形态学评判。结果:红核脊髓束损伤组大鼠术后左侧前肢伸肌瘫痪,前肢选择支撑实验显示其伸肌功能受限; BDA神经示踪法结果显示在颈段平面,仅见一束BDA阳性反应产物在右侧走行,在脊髓侧索的背侧半下行至腰段,而在损伤平面以下,损伤侧未见BDA阳性反应产物在脊髓外侧索中走行。Fluoro-Ruby逆行荧光标记神经法结果发现术后4w右侧中脑红核标记神经元内的神经元细胞数量和形态未见有改变,而在8w出现数量明显减少,并可见到红核内细胞出现变性、萎缩。NADPH组织化学染色可见到红核脊髓束损伤侧的脊髓外侧索出现较多深蓝色的阳性标记细胞,并有较多深染阳性突起。结论:选择在颈髓切断一侧红核脊髓束,损伤区和红核内NOS含量增高,红核神经元显着减少,表明红核神经元发生了逆行性损伤,是研究红核脊髓束的可塑性和神经轴突再生的理想动物模型。BDA神经束路示踪法和FR逆行荧光示踪法可作为红核脊髓束损伤模型的形态学指标。第三部分雌激素对去卵巢大鼠脊髓损伤后红核神经元保护作用的实验研究目的:研究雌激素E2对去卵巢雌性大鼠脊髓损伤后逆行性红核神经损伤的保护作用和促进肢体功能恢复的作用。方法:将大鼠分为红核脊髓束损伤组、E2治疗组、雌激素受体拮抗剂（ICI 182,780）组、E2+ICI组、正常组。切断SD大鼠脊髓C3-C4背外侧索制作红核脊髓束半横断损伤模型,并在损伤区分别放置吸附有E2、E2+ICI、ICI的明胶海绵;术后应用前肢支撑探测实验,BDA顺行示踪法, FR逆行神经示踪技术,NADPH组织化学与GFAP免疫蛋白印迹法,观察雌激素对去卵巢雌性大鼠脊髓损伤后对红核神经元的影响。结果:E2组行为功能评分与红核脊髓束损伤组及E2+ICI、ICI组没有明显差异。FR标记的损伤侧红核神经元数,E2组明显多于损伤组（p < 0.05）。E2组脊髓损伤侧产生的反应性NOS少于红核脊髓束损伤组及E2+ICI、ICI组（p < 0.05）,中脑红核部位反应性NOS与损伤组没有明显的区别。脊髓内GFAP表达量,E2组显着低于红核脊髓束损伤组及E2+ICI、ICI组（p< 0.05）。结论:雌激素可减轻红核脊髓束损伤后的继发损伤,而对运动神经元发挥保护作用,从而对肢体功能的恢复起到促进作用。
二、禽类红核脊髓束的细胞构筑和机能—HRP和免疫组化结合法研究（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、禽类红核脊髓束的细胞构筑和机能—HRP和免疫组化结合法研究（论文提纲范文）
（1）黑曲霉ANSTJ01菌株安全性评价及鸡球虫EtMIC2外源蛋白表达（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 1 前言 |
| 1.1 黑曲霉表达系统及异源表达研究 |
| 1.1.1 黑曲霉简介 |
| 1.1.2 黑曲霉表达系统 |
| 1.1.3 黑曲霉表达系统中异源蛋白的表达研究 |
| 1.2 表面展示系统及其研究 |
| 1.2.1 噬菌体表面展示技术 |
| 1.2.2 细菌表面展示系统 |
| 1.2.3 酵母表面展示系统 |
| 1.2.4 丝状真菌表面展示系统 |
| 1.2.5 表面展示系统的应用 |
| 1.3 EtMIC2蛋白及其应用研究 |
| 1.3.1 鸡球虫病的研究 |
| 1.3.2 EtMIC抗原蛋白简介 |
| 1.3.3 EtMIC2的应用及研究进展 |
| 1.4 本研究的目的和意义 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 材料 |
| 2.1.1 菌株、载体、实验动物 |
| 2.1.2 引物、载体、酶和试剂盒 |
| 2.1.3 主要仪器 |
| 2.2 方法 |
| 2.2.1 溶液与培养基的配制 |
| 2.2.2 目的基因的扩增 |
| 2.2.3 黑曲霉菌株的活化与保存 |
| 2.2.4 黑曲霉孢子制备 |
| 2.2.5 黑曲霉培养物对肉雏鸡动物安全性试验 |
| 2.2.6 黑曲霉(ANSTJO1)及黑曲霉标准组(2485)相比对雏鸡增重影响 |
| 2.2.7 大肠杆菌感受态的制备 |
| 2.2.8 菌株克隆及筛选 |
| 2.2.9 异源蛋白外分泌表达质粒构建 |
| 2.2.10 GFP表达质粒的构建 |
| 2.2.11 黑曲霉原生质体的制备及转染 |
| 2.2.12 EtMIC2稳定表达载体构建 |
| 2.2.13 表达GFP与MIC2蛋白结果检测 |
| 2.2.14 黑曲霉表面展示系统的构建 |
| 3 结果 |
| 3.1 黑曲霉ANSTJ01菌株生物安全性评价 |
| 3.1.1 黑曲霉添加剂对海兰褐雏鸡的生长速度的影响 |
| 3.1.2 血常规检测 |
| 3.1.3 相关脏器的组织切片观察 |
| 3.2 ANSTJ01菌株与2485菌株对雏鸡生长速度及免疫器官的影响 |
| 3.2.1 ANSTJ01菌株与2485菌株对雏鸡生长速度比较 |
| 3.2.2 ANSTJ01菌株与2485菌株对雏鸡免疫器官的比较 |
| 3.3 黑曲霉原生质体转化体系的建立 |
| 3.3.1 黑曲霉ANSTJ01菌株抗性标记筛选 |
| 3.3.2 黑曲霉ANTS原生质体制备 |
| 3.4 ANSTJ01外分泌系统的构建 |
| 3.4.1 基础质粒构建 |
| 3.4.2 GPP质粒鉴定 |
| 3.4.3 GFP外分泌表达 |
| 3.4.4 pPshD-GFP-EtMIC2的构建及表达 |
| 3.4.5 优化阳性菌株C源培养基 |
| 3.5 ANSTJ01表面展示系统 |
| 3.5.1 pPshD-CBM-GFP表面展示 |
| 3.5.2 ANSTJ01-MIC2表面展示菌株 |
| 4 讨论 |
| 4.1 黑曲霉ANSTJ01菌株对海兰褐雏鸡安全性评价 |
| 4.2 黑曲霉外分泌系统 |
| 4.3 黑曲霉表面展示系统 |
| 5 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
（2）不同频率电针对山羊痛阈和中枢P物质表达水平的影响（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 缩略词表 |
| 1 引言 |
| 1.1 文献综述 |
| 1.1.1 针刺镇痛的原理 |
| 1.1.1.1 针刺镇痛的起源和发展 |
| 1.1.1.2 兽医针刺镇痛的研究 |
| 1.1.1.3 针刺镇痛的若干影响因素 |
| 1.1.1.4 针刺镇痛的神经机制研究 |
| 1.1.1.5 针刺镇痛的神经化学机制研究 |
| 1.1.1.6 针刺镇痛的通路研究 |
| 1.1.2 P物质的研究进展 |
| 1.1.3 P物质相关核团的研究进展 |
| 1.2 研究内容 |
| 1.3 研究目的和意义 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 实验试剂 |
| 2.2 主要仪器设备 |
| 2.3 实验方法 |
| 2.3.1 实验动物及分组 |
| 2.3.2 电针方法 |
| 2.3.3 痛阈测定 |
| 2.3.4 灌流固定 |
| 2.3.5 取材与固定 |
| 2.3.6 组织切片 |
| 2.3.7 免疫组化 |
| 2.3.7.1 免疫组化试剂的最佳工作浓度 |
| 2.3.7.2 SABC免疫组化方法与步骤 |
| 2.3.7.3 结果统计 |
| 2.4 数据分析 |
| 3 结果与分析 |
| 3.1 不同频率电针对山羊痛阈的影响 |
| 3.2 不同频率电针对山羊脑内P物质表达水平的影响 |
| 3.2.1 不同频率电针对山羊间脑和端脑中P物质含量的影响 |
| 3.2.2 不同频率对山羊中脑和脑桥核团中P物质表达水平的影响 |
| 3.2.3 不同频率电针对山羊延髓核团和脊髓中P物质表达水平的影响 |
| 4. 讨论 |
| 4.1 不同频率电针和山羊痛阈的关系 |
| 4.2 不同频率电针对山羊中枢相关核团内P物质表达水平的影响 |
| 5 结论 |
| 6 问题与展望 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 致谢 |
（3）不同强度光照对母鸡中脑和间脑c-fos基因表达的影响（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 1 引言 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 动物 |
| 2.2 主要材料与仪器 |
| 2.2.1 主要试剂及药品 |
| 2.2.2 主要仪器设备 |
| 2.3 试验方法 |
| 2.3.1 免疫组化试验 |
| 2.3.2 原位杂交试验 |
| 2.3.3 Western bolt |
| 2.3.4 GnRH 的免疫组化检测 |
| 3 结果与分析 |
| 3.1 c-Fos 蛋白免疫组化检测 |
| 3.1.1 Fos 蛋白阳性样免疫反应的特点 |
| 3.1.2 Fos 样免疫反应阳性神经元的分布和形态 |
| 3.1.3 不同强度光照诱导母鸡 Fos 样免疫反应阳性神经元的分布密度 |
| 3.1.4 统计学分析 |
| 3.2 原位杂交检测结果 |
| 3.2.1 原位杂交检测 Fos 蛋白阳性样反应的特点 |
| 3.2.2 原位杂交检测FOS 样阳性神经元的分布和形态 |
| 3.2.3 原位杂交检测FOS 样阳性神经元的分布密度 |
| 3.2.4 统计学分析 |
| 3.3 WESTERN BLOT 检测 |
| 3.4 GNRH 免疫组化检测 |
| 4 讨论 |
| 4.1 不同强度光照对鸡生产性能的影响 |
| 4.2 鸡脑参与光信息传递过程的中枢通路 |
| 4.3 光信息通路神经核团的 GnRH 分泌与含量对母鸡生殖功能起调节作用 |
| 4.4 不同强度光照对母鸡间脑和中脑的神经核的影响 |
| 5 结论 |
| 参考文献 |
| 在读期间发表的学术论文 |
| 作者简历 |
| 致谢 |
（4）妊娠期大鼠子宫中5-HT和VIP及其受体的表达（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一章 文献综述 |
| 1.1 子宫的组织学结构特点 |
| 1.2 神经、免疫、内分泌系统对子宫调控的研究概况 |
| 1.2.1 神经-免疫-内分泌系统间的关系 |
| 1.2.2 子宫神经支配的研究概况 |
| 1.2.3 子宫免疫调控的研究概况 |
| 1.2.4 子宫内分泌调控的研究概况 |
| 1.3 5-HT、5-HT_(1A) 受体、VIP 和VIP_2 受体的研究进展 |
| 1.3.1 5-羟色胺的研究进展 |
| 1.3.2 5-HT_(1A) 受体的研究进展 |
| 1.3.3 血管活性肠肽的研究进展 |
| 1.3.4 VIP_2 受体的研究进展 |
| 1.4 选题的目的和意义 |
| 第二章 试验研究 |
| 试验一 大鼠妊娠期子宫的组织学变化 |
| 1.1 试验材料与方法 |
| 1.1.1 试验材料 |
| 1.1.2 试验方法 |
| 1.1.3 石蜡切片制备 |
| 1.1.4 HE 染色程序 |
| 1.2 结果 |
| 1.2.1 大鼠妊娠期子宫的组织学变化 |
| 1.3 讨论 |
| 1.4 小结 |
| 试验二 5-羟色胺及5-HT_(1A)受体在妊娠期大鼠子宫中的表达 |
| 2.1 材料与方法 |
| 2.1.1 试验材料 |
| 2.1.2 试验方法 |
| 2.1.3 石蜡切片制备 |
| 2.1.4 石蜡切片免疫组织化学超敏SP 法染色程序 |
| 2.1.5 结果判断 |
| 2.1.6 统计学处理 |
| 2.2 结果 |
| 2.2.1 5-HT 和5-HT_(1A) 受体免疫组织化学染色结果 |
| 2.2.2 5-HT 和5-HT_(1A) 受体免疫反应产物在子宫组织中的分布特点及定位 |
| 2.2.3 5-HT 和5-HT_(1A) 受体妊娠各阶段大鼠子宫组织中的分布变化规律 |
| 2.2.4 妊娠各阶段子宫组织5-HT 和5-HT_(1A) 受体相对表达量的差异性分析 |
| 2.2.5 妊娠各阶段子宫组织5-HT 和5-HT_(1A) 受体表达的相关性分析 |
| 2.3 讨论 |
| 2.4 小结 |
| 试验三 血管活性肠肽和VIP_2受体在妊娠期大鼠子宫中的表达 |
| 3.1 材料与方法 |
| 3.1.1 试验材料 |
| 3.1.2 试验方法 |
| 3.1.3 石蜡切片制备 |
| 3.1.4 石蜡切片免疫组织化学超敏SP 法染色程序 |
| 3.1.5 结果判断 |
| 3.1.6 统计学处理 |
| 3.2 结果 |
| 3.2.1 VIP 和 VIP_2 受体免疫组织化学染色结果 |
| 3.2.2 VIP 和 VIP_2 受体免疫反应产物在子宫组织中的分布特点及定位 |
| 3.2.3 VIP 和 VIP_2 受体妊娠各阶段大鼠子宫组织中的分布变化规律 |
| 3.2.4 妊娠各阶段子宫组织VIP 和 VIP_2 受体相对表达量的差异性分析 |
| 3.2.5 妊娠各阶段子宫组织VIP 和 VIP_2 受体表达的相关性分析 |
| 3.3 讨论 |
| 3.4 小结 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
（5）鸵鸟小脑的形态学及GABA在其小脑内分布研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 缩略语表 |
| 第1章 前言 |
| 1 立题背景 |
| 2 文献综述 |
| 2.1 非洲鸵鸟的研究概况 |
| 2.2 小脑的研究现状 |
| 2.3 小脑的功能与作用 |
| 2.4 GABA的研究现状 |
| 2.5 GABA的生物学作用 |
| 2.6 GABA及其受体的测定方法 |
| 2.7 GABA与小脑的联系 |
| 第2章 非洲鸵鸟小脑的形态学研究 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 材料与方法 |
| 2.2.1 材料 |
| 2.2.2 试验方法 |
| 2.3 试验结果 |
| 2.3.1 小脑皮质结构 |
| 2.3.2 小脑中央核 |
| 2.4 讨论 |
| 2.5 小结 |
| 第3章 雏鸵鸟小脑的发育规律及GABA表达与年龄的相关性 |
| 3.1 引言 |
| 3.1.1 材料 |
| 3.1.2 试验方法 |
| 3.2 试验结果 |
| 3.2.1 Nissl染色 |
| 3.2.2 GABA免疫组织化学染色 |
| 3.3 讨论 |
| 3.3.1 不同日龄雏鸵鸟小脑的Nissl染色 |
| 3.3.2 不同日龄雏鸵鸟小脑的免疫组化染色 |
| 3.4 小结 |
| 第4章 GABA免疫阳性神经元在鸵鸟和其他家禽小脑内分布的比较研究 |
| 4.1 引言 |
| 4.2 材料与方法 |
| 4.2.1 材料 |
| 4.2.2 试验方法 |
| 4.3 试验结果 |
| 4.3.1 免疫组化结果 |
| 4.3.2 GABA免疫反应物在非洲鸵鸟和其他家禽小脑内分布的比较 |
| 4.4 讨论 |
| 4.4.1 GABA免疫反应物在非洲鸵鸟和其他家禽小脑内分布的比较 |
| 4.4.2 GABA与蒲肯野细胞之间的关系 |
| 4.5 小结 |
| 本研究的创新之处 |
| 下一步研究计划 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 附录1 个人简介 |
| 附录2 个人获奖情况 |
| 附录3 攻读硕士学位期间发表的论文 |
| 附录4 参加学术交流活动情况 |
（6）摩杂一代水牛与广西本地水牛下丘脑神经核团形态学及细胞构筑比较研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一部分 综述 |
| 第一章 哺乳动物神经系统概述 |
| 1.1 神经系统的发育 |
| 1.2 神经系统的组成 |
| 第二章 下丘脑 |
| 2.1 下丘脑的位置和形态结构 |
| 2.2 下丘脑的生理功能 |
| 第三章 动物下丘脑神经元分布的研究进展 |
| 3.1 一氧化氮合酶(NOS)神经元 |
| 3.2 催产素(OT)神经元 |
| 3.3 促性腺激素释放激素(GnRH)神经元 |
| 3.4 加压素(VP)神经元 |
| 3.5 生长抑素(SRIF)神经元 |
| 3.6 脑啡肽(ENK)神经元 |
| 3.7 其它神经元 |
| 3.8 小结 |
| 第二部分 论文 |
| 前言 |
| 第一章 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 方法 |
| 1.3 本实验的一些说明 |
| 第二章 实验结果 |
| 2.1 水牛下丘脑解剖学观察 |
| 2.2 水牛下丘脑视交叉上核细胞构筑 |
| 2.3 水牛下丘脑前核细胞构筑 |
| 2.4 水牛下丘脑视前区细胞构筑 |
| 2.5 水牛下丘脑室旁核细胞构筑 |
| 2.6 水牛下丘脑背内侧核细胞构筑 |
| 2.7 水牛下丘脑后核细胞构筑的 |
| 2.8 水牛下丘脑腹内侧核细胞构筑 |
| 2.9 水牛下丘脑乳头体细胞构筑 |
| 2.10 水牛下丘脑弓状核细胞构筑 |
| 第三章 分析与讨论 |
| 3.1 脑结构的定位及下丘脑核团的定位 |
| 3.2 脑细胞的形态及组成 |
| 3.3 水牛下丘脑视交叉上核细胞构筑的比较 |
| 3.4 水牛下丘脑前核细胞构筑的比较 |
| 3.5 水牛视前区细胞构筑的比较 |
| 3.6 水牛下丘脑室旁核细胞构筑的比较 |
| 3.7 水牛背内侧核细胞构筑的比较 |
| 3.8 水牛后核细胞构筑的比较 |
| 3.9 水牛腹内侧核细胞构筑的比较 |
| 3.10 水牛乳头体细胞构筑的比较 |
| 3.11 水牛弓状核细胞构筑的比较 |
| 第四章 结论 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 致谢 |
| 作者简历 |
| 论文发表情况 |
（7）奶山羊黄体弥散性神经内分泌细胞标志物的表达特点（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一章 弥散性神经内分泌系统的综述 |
| 1.1 弥散性神经内分泌系统概念 |
| 1.2 DNES 细胞的组成、分泌物及其功能 |
| 1.2.1 DNES 细胞的组成和分泌物 |
| 1.2.2 DNES 细胞分泌物的功能 |
| 1.3 DNES 细胞的形态结构特点 |
| 1.3.1 DNES 细胞的一般形态结构 |
| 1.3.2 细胞超微结构特点 |
| 1.3.3 分泌颗粒的嗜银性 |
| 1.4 DNES 细胞鉴别方法 |
| 1.4.1 银染法 |
| 1.4.2 超薄切片观察法 |
| 1.4.3 组织化学方法 |
| 1.4.4 免疫组织化学方法 |
| 1.4.5 原位杂交技术 |
| 1.5 DNES 细胞标志物 |
| 1.5.1 神经元特异性烯醇化酶(neuronspecificeno-lase, NSE) |
| 1.5.2 突触素(synaptophysin, SYP) |
| 1.5.3 S-100 蛋白(S-100protein) |
| 1.5.4 5-羟色胺(5-hydroxytryptamine, 5-HT) |
| 1.5.5 铬粒素(chromogranin)，或称嗜铬粒蛋白 |
| 1.5.6 其他 |
| 1.6 DNES 与疾病及免疫的关系 |
| 1.6.1 DNES 与疾病的关系 |
| 1.6.2 DNES 与免疫的关系 |
| 第二章 DNES 细胞标志物的研究进展 |
| 2.1 5-羟色胺 |
| 2.1.1 5-HT 的生物合成 |
| 2.1.2 5-HT 能神经元在中枢神经系统的分布 |
| 2.1.3 5-HT 受体 |
| 2.1.4 5-HT 的生物学功能 |
| 2.1.5 展望 |
| 2.2 神经元特异性烯醇化酶 |
| 2.2.1 NSE 组成与分布 |
| 2.2.2 NSE 与神经系统疾病 |
| 2.2.3 展望 |
| 2.3 突触素 |
| 2.3.1 突触素的结构 |
| 2.3.2 突触素的分类和生化特征 |
| 2.3.3 突触素的组织学分布 |
| 2.3.4 突触素的应用 |
| 2.3.5 展望 |
| 2.4 S-100 蛋白 |
| 2.4.1 S-100 蛋白的一般特征 |
| 2.4.2 S-100 蛋白的结构与分布 |
| 2.4.3 S-100 蛋白的生物学作用及其作用机制 |
| 2.4.4 S-100 蛋白的应用 |
| 2.4.5 展望 |
| 第三章 山羊卵巢黄体中弥散性神经内分泌细胞的鉴定 |
| 3.1 材料与方法 |
| 3.1.1 主要仪器设备及试剂 |
| 3.1.2 实验动物与取材 |
| 3.1.3 免疫组织化学SP 法染色程序 |
| 3.1.4 图像分析 |
| 3.1.5 数据处理 |
| 3.2 结果 |
| 3.3 讨论 |
| 第四章 四种弥散性神经内分泌细胞标志物在黄体中的共存 |
| 4.1 材料方法 |
| 4.1.1 主要仪器设备及试剂 |
| 4.1.2 实验动物与取材 |
| 4.1.3 染色操作程序 |
| 4.1.4 图像分析 |
| 4.1.5 数据处理 |
| 4.2 结果 |
| 4.3 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
（8）齐口裂腹鱼消化道及脑中六种脑肠肽的免疫组织化学研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 1.前言 |
| 1.1 齐口裂腹鱼的保护与研究概况 |
| 1.2 六种脑肠肽的分布及功能 |
| 1.2.1 β-EP |
| 1.2.2 Gas |
| 1.2.3 NPY |
| 1.2.4 Som |
| 1.2.5 VIP |
| 1.2.6 5-HT |
| 1.3 研究的目的和意义 |
| 2.材料与方法 |
| 2.1 材料 |
| 2.1.1 试验动物 |
| 2.1.2 主要试剂 |
| 2.1.3 主要仪器设备 |
| 2.2 方法 |
| 2.2.1 H.E染色法 |
| 2.2.2 免疫组织化学法 |
| 2.2.3 统计方法 |
| 3.结果 |
| 3.1 消化道和脑的一般形态组织结构 |
| 3.1.1 消化道 |
| 3.1.2 脑 |
| 3.1.2.1 端脑 |
| 3.1.2.2 间脑 |
| 3.1.2.3 中脑 |
| 3.1.2.4 小脑 |
| 3.1.2.5 延脑 |
| 3.2 免疫组织化学 |
| 3.2.1 消化道 |
| 3.2.2 脑 |
| 3.2.2.1 β-EP |
| 3.2.2.2 Gas |
| 3.2.2.3 NPY |
| 3.2.2.4 Som |
| 3.2.2.5 VIP |
| 3.2.2.6 5-HT |
| 4.讨论 |
| 4.1 β-EP |
| 4.2 Gas |
| 4.3 NPY |
| 4.4 Som |
| 4.5 VIP |
| 4.6 5-HT |
| 5.结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 图版 |
| 图版说明 |
| 攻读硕士期间发表论文情况 |
（9）黄牛能量平衡调控候选基因遗传变异及其与生长性状相关分析（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一章 文献综述 |
| 1.1 本研究候选基因研究进展 |
| 1.1.1 神经肽Y（NPY） |
| 1.1.2 刺鼠相关蛋白（AGRP） |
| 1.1.3 可卡因－安非他明转录体（CART） |
| 1.1.4 阿片-黑素皮质素原（POMC） |
| 1.1.5 黒素皮质素受体基因（MCR）的研究 |
| 1.1.6 Ghrelin |
| 1.1.7 单胺系统 |
| 1.2 家畜分子遗传标记技术 |
| 1.3 问题与展望 |
| 第二章 材料与方法 |
| 2.1 试验材料 |
| 2.1.1 试验动物样本来源 |
| 2.1.2 试验数据的收集 |
| 2.1.3 试验主要试剂 |
| 2.1.4 溶液与缓冲液 |
| 2.1.5 仪器设备 |
| 2.1.6 主要试剂和溶液的配制 |
| 2.2 试验方法 |
| 2.2.1 血样的采集 |
| 2.2.2 牛全血基因组DNA 的提取 |
| 2.2.3 PCR 反应所用引物的设计 |
| 2.2.4 DNA 质量的检测、纯化及浓度计算 |
| 2.2.5 扩增产物的PCR-RFLP 分析 |
| 2.2.6 图像分析 |
| 2.2.7 扩增产物的PCR-SSCP 分析 |
| 2.2.8 测序 |
| 2.3 资料的统计与分析 |
| 2.3.1 基因频率和基因型频率的计算 |
| 2.3.2 基因频率和基因型频率的差异显着性检验（χ~2 独立性检验） |
| 2.3.3 位点遗传纯合度（Ho）、杂合度（He）和有效等位基因数（Ne） |
| 2.3.4 多态信息含量（polymorphism information content, PIC） |
| 2.3.5 单倍型分析（haplotype analysis） |
| 2.3.6 相关分析统计模型 |
| 第三章 候选基因遗传变异检测 |
| 3.1 牛基因组DNA 样品的检测 |
| 3.2 AGRP 基因SNP 检测 |
| 3.2.1 PCR 扩增结果 |
| 3.2.2 PCR-SSCP 结果 |
| 3.2.3 A2 MspI 限制性酶切结果 |
| 3.3 CART 基因SNP 检测 |
| 3.3.1 PCR 扩增结果 |
| 3.3.2 PCR-SSCP 结果 |
| 3.4 POMC 基因SNP 检测 |
| 3.4.1 PCR 扩增结果 |
| 3.4.2 PCR-SSCP 结果 |
| 3.5 MC3R 基因SNP 检测 |
| 3.5.1 PCR 扩增结果 |
| 3.5.2 PCR-SSCP 结果 |
| 3.6 MC4R 基因SNP 检测 |
| 3.6.1 PCR 扩增结果 |
| 3.6.2 PCR-SSCP 结果 |
| 3.6.3 PCR-RFLP 结果 |
| 3.7 Ghrelin 基因SNP 检测 |
| 3.7.1 PCR 扩增结果 |
| 3.7.2 PCR-SSCP 结果 |
| 3.8 HTR1B 基因 SNP 检测 |
| 3.8.1 PCR 扩增结果 |
| 3.8.2 PCR-SSCP 结果 |
| 3.9 HTR2A 基因遗传变异检测 |
| 3.9.1 PCR 扩增结果 |
| 3.9.2 PCR-SSCP 结果 |
| 第四章 候选基因多态基因座的群体遗传学分析 |
| 4.1 AGRP 基因群体遗传结构分析 |
| 4.1.1 A0 基因座 |
| 4.1.2 A2 基因座 |
| 4.1.3 AGRP 基因单倍型频率 |
| 4.2 CART 基因群体遗传结构分析 |
| 4.2.1 C1 基因座 |
| 4.2.2 C2 基因座 |
| 4.2.3 C3 基因座 |
| 4.2.4 C4 基因座 |
| 4.3 POMC 基因群体遗传结构分析 |
| 4.4 MC3R 基因群体遗传结构分析 |
| 4.4.1 MC3R1 基因座 |
| 4.4.2 MC3R2 基因座 |
| 4.4.3 MC3R3 基因座 |
| 4.4.4 MC3R 基因单倍型分析 |
| 4.5 MC4R 基因群体遗传结构分析 |
| 4.5.1 MC4R4 基因座 |
| 4.5.2 MC4R5 基因座 |
| 4.5.3 MC4R 基因单倍型分析 |
| 4.6 Ghrelin 基因群体遗传结构分析 |
| 4.7 HTR1B 基因群体遗传结构分析 |
| 第五章 候选基因多态性与南阳牛、秦川牛和郏县红牛生长性状相关分析 |
| 5.1 南阳牛群体内各基因多态基因座与生长性状的相关分析 |
| 5.1.1 南阳牛群体内AGRP 基因多态基因座与生长性状的相关分析 |
| 5.1.2 南阳牛群体内CART 基因多态基因座与生长性状的相关分析 |
| 5.1.3 南阳牛群体内POMC 基因多态基因座与生长发育性状的分析 |
| 5.1.4 南阳牛群体内MC3R 基因多态基因座与生长性状的相关分析 |
| 5.1.5 南阳牛群体内MC4R 基因多态基因座与生长性状的相关分析 |
| 5.1.6 南阳牛群体内Ghrelin 基因多态基因座与生长性状的相关分析 |
| 5.2 秦川牛群体内各基因多态基因座与生长性状的相关分析 |
| 5.2.1 秦川牛群体内AGRP 基因多态基因座与生长性状的相关分析 |
| 5.2.2 秦川牛群体内POMC 基因多态基因座与生长性状的相关分析 |
| 5.2.3 秦川牛群体内CART 基因多态基因座与生长性状的相关分析 |
| 5.2.4 秦川牛群体内MC3R 基因多态基因座与生长性状的相关分析 |
| 5.2.5 秦川牛群体内MC4R 基因多态基因座与生长性状的相关分析 |
| 5.2.6 秦川牛群体内Ghrelin 基因多态基因座与生长性状的相关分析 |
| 5.3 郏县红牛群体内基因多态性与生长性状的相关分析 |
| 5.3.1 郏县红牛群体内POMC 基因多态基因座与生长性状的相关分析 |
| 5.3.2 郏县红牛群体内MC4R 基因多态基因座与生长性状的相关分析 |
| 5.3.3 郏县红牛群体内Ghrelin 基因多态基因座与生长性状的相关分析 |
| 第六章 讨论与结论 |
| 6.1 讨论 |
| 6.1.1 聚丙烯酰胺凝胶中DNA 的染色方法 |
| 6.1.2 AGRP 基因多态性及其与生长性状相关分析 |
| 6.1.3 CART 基因多态性及其与生长性状相关分析 |
| 6.1.4 POMC 基因多态性及其与生长性状相关分析 |
| 6.1.5 MC3R 多态性及其与生长性状相关分析 |
| 6.1.6 MC4R 基因多态性及其与生长性状相关分析 |
| 6.1.7 Ghrelin 基因多态性及其与生长性状相关分析 |
| 6.1.8 HTR1B 基因多态性及其与生长性状相关分析 |
| 6.2 结论 |
| 6.3 本研究创新点 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
（10）大鼠红核脊髓束损伤模型的建立及雌激素对红核神经元保护作用的实验研究（论文提纲范文）
| 英文缩略词(Abbreviation) |
| 中文摘要(Abstract in Chinese) |
| 英文摘要(Abstract in English) |
| 引言(Introduction) |
| 第一部分 神经示踪技术观察大鼠红核脊髓束的定位 |
| 材料和方法(Materials and Methods) |
| 结果(Results) |
| 讨论(Discussion) |
| 结论(Conclusion) |
| 参考文献1 (References 1) |
| 第二部分 大鼠红核脊髓束损伤模型的建立与评价 |
| 材料和方法(Materials and Methods) |
| 结果(Results) |
| 讨论(Discussion) |
| 结论(Conclusion) |
| 参考文献2 (References 2) |
| 第三部分 雌激素对去卵巢大鼠脊髓损伤后红核神经元保护作用的实验研究 |
| 材料和方法(Materials and Methods) |
| 结果(Results) |
| 讨论(Discussion) |
| 结论(Conclusion) |
| 参考文献3 (References 3) |
| 综述(Review) |
| 综述参考文献(References) |
| 致谢(Acknowledgements) |
| 在读期间发表论文 |
| 在读期间所获奖励 |
四、禽类红核脊髓束的细胞构筑和机能—HRP和免疫组化结合法研究（论文参考文献）
- [1]黑曲霉ANSTJ01菌株安全性评价及鸡球虫EtMIC2外源蛋白表达[D]. 毛小龙. 山东农业大学, 2018(09)
- [2]不同频率电针对山羊痛阈和中枢P物质表达水平的影响[D]. 魏丽娜. 华中农业大学, 2011(05)
- [3]不同强度光照对母鸡中脑和间脑c-fos基因表达的影响[D]. 兰晓宇. 河北农业大学, 2010(10)
- [4]妊娠期大鼠子宫中5-HT和VIP及其受体的表达[D]. 郝建军. 西北农林科技大学, 2010(11)
- [5]鸵鸟小脑的形态学及GABA在其小脑内分布研究[D]. 罗厚强. 华中农业大学, 2009(07)
- [6]摩杂一代水牛与广西本地水牛下丘脑神经核团形态学及细胞构筑比较研究[D]. 潘堂峰. 广西大学, 2007(05)
- [7]奶山羊黄体弥散性神经内分泌细胞标志物的表达特点[D]. 蒋田园. 西北农林科技大学, 2007(S2)
- [8]齐口裂腹鱼消化道及脑中六种脑肠肽的免疫组织化学研究[D]. 樊均德. 四川农业大学, 2007(03)
- [9]黄牛能量平衡调控候选基因遗传变异及其与生长性状相关分析[D]. 张春雷. 西北农林科技大学, 2007(06)
- [10]大鼠红核脊髓束损伤模型的建立及雌激素对红核神经元保护作用的实验研究[D]. 栗卓. 南通大学, 2007(07)