RAPD对中国食人按蚊种类的分析

一、用RAPD技术分析中国嗜人按蚊种型（论文文献综述）

钟敏,蔺应学,王英^[1]（2014）在《分子生物学技术在按蚊近缘种鉴定的应用进展》文中提出按蚊是传播疟疾等疾病的主要媒介生物,按蚊属包括几个甚至十几个近缘种组成的复合体,某些近缘种之间的形态极其相似,但其生态习性却明显不同,传病能力也有显着差异,因此正确进行蚊种鉴定对疾病预警等非常重要。单纯靠传统的形态学鉴定已不能满足按蚊近缘种和种内变异鉴别的需要,近年来,分子生物学技术在鉴定按蚊近缘种方面已成为研究的热点,本文就PCR技术、DNA探针、RAPD、RFLP、分子标志等分子生物学技术在按蚊近缘种鉴定的应用进展进行综述。

彭淑琼,刘春晓,赵纯中,徐云庆^[2]（2010）在《分子生物学技术在蚊虫分类中的应用》文中研究指明由于蚊虫中存在许多由形态相似的隐种组成的种团或复合体,沿用传统的方法对其分类和鉴别较为困难,因此,寻找合适的特征和方法成为新世纪蚊虫分类工作者研究的重点内容之一。分子鉴别是较为活跃的研究领域之一,它以遗传的本质DNA为依据来阐明物种间的差别,从分子水平上鉴别物种,具有客观、准确的特点,在蚊虫分类中广为应用。而应用分子标志研究群体遗传结构是近年来进展最为迅速的领域之一,目前公认mtDNA部分基因序列和微卫星DNA较为理想。

孙立新,吴汉霞,张荣波,丁永健,朱国强,杨庆贵,朱临^[3]（2010）在《蚊分类鉴定研究进展》文中认为综述了蚊分类学研究进展,重点阐述了形态学、生物化学、细胞染色体技术和分子生物学技术等在蚊分类中的应用,文中指出采用各种不同的分类方法,才能多层次、多方面、系统地研究蚊虫分类鉴别,才能反映种间亲缘关系、分类进化的全貌,才能够更客观、更科学地进行蚊虫分类鉴别。

王芙蓉,吴薇,荣德福^[4]（2008）在《分子生物学技术在检疫性昆虫鉴定中的应用前景》文中提出综述了几种分子生物学技术的特点及其近年来在昆虫分类中的应用。分析了形态学分类方法在检疫性昆虫鉴定中所存在的问题,并探讨了分子生物学技术在检疫性昆虫鉴定中的应用前景。

孙恩涛,张锡林,秦志辉^[5]（2007）在《媒介按蚊遗传标记的研究进展》文中研究指明按蚊是疟疾、丝虫病和多种虫媒病毒病的传播媒介。按蚊种团、复合体内的近缘种在生态习性、媒介效能和对化学杀虫剂的敏感性等方面均存在一定差异。因此按蚊种团、复合体的分类鉴定与遗传多态性研究受到广泛关注。多线染色体的研究,对按蚊分类鉴定的发展起着积极作用,而多种分子标记为按蚊系统发育和种群遗传学的研究提供了新方法。目前,分子标记已从经典分子标记和高度多态性分子标记发展到基因组DNA单核苷酸多态性的检测和鉴定。笔者综述了近年来按蚊遗传标记的国内外研究进展。

孙恩涛^[6]（2007）在《传疟媒介大劣按蚊和斯氏按蚊基因组DNA遗传多态性研究》文中认为目的比较对约氏疟原虫不易感的大劣按蚊和易感的斯氏按蚊基因组DNA遗传多态性,探讨媒介按蚊基因型与疟原虫基因型间的相互关系。方法应用随机扩增多态性DNA（Random amplified polymorphic DNA,RAPD）技术对大劣按蚊和斯氏按蚊雌性成蚊基因组DNA进行分析,扩增产物经琼脂糖凝胶电泳后,分析比较结果。从5条随机引物中筛选出重复性好、谱带清晰并呈多态性的引物,对迁移率相同的DNA条带进行回收、纯化,与pMD-18T载体连接,转化入大肠杆菌XL1-blue,经PCR鉴定后,目的基因测序,采用相关在线程序及软件进行序列比较分析;同时,对大劣按蚊和斯氏按蚊核糖体基因内转录第二间隔区（rDNA ITS2）进行PCR扩增,应用限制性片断长度多态性分析（Restriction Fragment Length Polymorphism,RFLP）技术分析PCR产物,并回收、纯化扩增的目的基因片段,经TA克隆后测序鉴定,采用相关软件进行序列比较分析。在GenBank数据库中查找其它传疟按蚊的rDNA ITS2序列,用Clust W软件进行多序列比对,MEGA软件构建分子系统树。结果大劣按蚊和斯氏按蚊RAPD谱带具有明显的种间差异,其中引物P3、P4和P5对两种按蚊成蚊基因组DNA进行RAPD扩增,均扩增出清晰、稳定性好、多态性丰富的谱带。引物P4对两种按蚊基因组DNA扩增,有4对迁移率相同的DNA条带。序列比较分析显示此4对DNA条带在序列长度和组成上均呈现多态性,碱基差异水平为60.0%～61.9%;序列的GC含量和简单重复序列（SimpleSequence Repeat,SSR）具有明显多态性。同时,大劣按蚊和斯氏按蚊ITS2序列的PCR扩增产物经限制性内切酶Xho I消化,产生不同的酶切图谱,存在基因多态性。测序结果显示大劣按蚊和斯氏按蚊ITS2基因分别为715bp和466bp,两者碱基差异水平为53.5%;两种按蚊ITS2序列的GC含量和简单重复序列也存在明显的多态性。分子系统树显示,大劣按蚊和斯氏按蚊形成单独的支系。结论大劣按蚊和斯氏按蚊基因组DNA序列间存在多态性,其基因的多态性可能与大劣按蚊和斯氏按蚊对约氏疟原虫产生不同的易感性相关。大劣按蚊和斯氏按蚊间存在不同的遗传背景,为进一步研究按蚊基因型与疟原虫基因型之间的相互作用奠定基础。

许国君,康杨,杨文,郁涛,魏红雨^[7]（2006）在《辽宁嗜人按蚊和广东嗜人按蚊实验种群的建立及生物学特性观察》文中提出目的:目的建立辽宁嗜人按蚊和广东嗜人按蚊实验室品系,观察其生物学特性。方法:采用人工交配繁殖,控温、控湿,加强自然光照,幼虫饲以颗粒小鱼饲料,成蚊以豚鼠饲血。对两地嗜人按蚊生长发育不同时期进行逐日记录观察。结果:控温、控湿在28℃±2℃、75%85%,以及充足光照的情况下,两种嗜人按蚊平均孵化率、幼虫成活率、蛹化率、羽化率,辽宁嗜人按蚊为74.10%、84.44%、91.26%、92.70%;广东嗜人按蚊为79.93%、77.88%、92.87%、96.07%。现已养育繁殖37个世代。结论:辽宁嗜人按蚊和广东嗜人按蚊实验室种群建立后,生物学特性稳定,可用于嗜人按蚊的多种实验研究。

潘波^[8]（2006）在《广东省嗜人按蚊分布特征、生态习性、传疟作用及蚊媒防制对策的研究》文中研究指明疟疾是严重危害人民健康的重要寄生虫病之一。在全球90多个国家或地区存在疟疾传播或流行，每年有3～5亿人感染，死亡人数达270万，被WHO确认为在全球范围内必须控制的头号传染病。在我国，疟疾曾流行于全国近80％的县、市，经过50余年的不懈努力，疟疾防治已经取得了巨大的成就。但疟疾具有传播快，易反复的流行特点，在疟疾流行与传播的基本条件尚无根本改变的情况下，疟疾卷土重来的严重威胁依然存在。嗜人按蚊（Anopheles anthropophagus）原称雷氏按蚊嗜人亚种（An.lesteri anthropophagus Xu & Feng，1975），属赫坎按蚊复合体。迄今记录仅分布于我国，据以往的调查报道嗜人按蚊主要分布于我国北纬33°以南广大的低山丘陵区，由于其分布面广，具有家栖、嗜吸人血的习性，与人的关系十分密切，其传疟作用是中华按蚊的20倍，经调查与研究证实为我国北纬33°以南疟疾传播与爆发流行的重要媒介。目前以嗜人按蚊为主要媒介的11个省、

康杨,许国君,杨文,郁涛,魏红雨^[9]（2005）在《中国五种不同地域嗜人按蚊卵及成蚊的观测比较》文中研究说明目的比较不同地域嗜人按蚊卵差异及成蚊的外部形态特征。方法对来自中国不同地域的嗜人按蚊经本实验室多次传代后,采用显微测微尺对蚊卵进行测定和比较,以放大镜观察成蚊外部形态特征。结果测得5种嗜人按蚊卵的宽度范围为155.2232.8μm;甲板宽度为14.638.8μm,平均为25.2μm;其甲板约占整个卵宽的7.5%21.1%,平均13.0%;浮囊约占卵长的百分比平均为70.9%。从卵的甲板和甲板占总卵宽的百分比来看,四川嗜人按蚊最窄,辽宁嗜人按蚊最宽,其排列顺序从大到小依次为辽宁、广东、广西、江苏和四川嗜人按蚊。5种嗜人按蚊成蚊外部形态基本一致,未见特殊形态特征。结论不同地域的嗜人按蚊成蚊形态无明显差异,5种不同地域嗜人按蚊卵的甲板宽度虽有一定差别,但其差别应属嗜人按蚊间的正常波动。

徐保海,许龙善,谢汉国,朱泰华,刘成模,潘波,刘庆生,吴军,谭爱军,王利群,阮峰,李凤华^[10]（2005）在《我国嗜人按蚊偏嗜牛血的研究》文中进行了进一步梳理目的 了解我国不同地区嗜人按蚊的吸血习性。方法 以人、畜帐诱捕法 ,调查广东省珠海市横琴岛 （北纬 2 2°0 5′）和辽宁省沈阳市法库县 （北纬 4 2°30′）嗜人按蚊趋吸人、牛血习性 ;以平均每人 （或每头牛 ）每夜诱获蚊数计算叮咬率 ,根据平均人、牛叮咬率和当地实际人、畜宿主数加权法估算嗜人按蚊人血指数 ;应用牛帐诱捕法观察嗜人按蚊夜间吸血活动节律。结果 嗜人按蚊是珠海市横琴岛和沈阳市法库县的优势蚊种 ,分别占全部捕获按蚊数的 81.78%和 99.96 %。珠海市横琴岛嗜人按蚊趋吸人、牛血率分别为 2 6 .4 5 %和 73.5 5 % ,其中深井观察点估算嗜人按蚊人血指数为 0 .6 17,三叠泉渡假区观察点无家畜 ,嗜人按蚊的人血指数为 1.0。沈阳市法库县嗜人按蚊趋吸人、牛血率分别为 0 .86 %和 99.14 % ,估算人血指数为0 .0 5 6。两地嗜人按蚊均于傍晚为吸血活动高峰 ,珠海市横琴岛 19.0 0 - 2 0 .0 0时占全部诱获蚊的 4 1.75 % ,2 3.0 0 - 2 4 .0 0时占 6 .5 3% ;沈阳市法库县 2 0 .0 0 - 2 1.0 0时占全部诱获蚊的 4 9.2 5 % ,2 3.0 0～ 2 4 .0 0时仅占 4 .92 %。结论 珠海市横琴岛和沈阳市法库县嗜人按蚊偏嗜牛血 ,吸血活动高峰出现于傍晚 ,明显不同于我国北纬 2 5°～ 33°地区文献报导的嗜人按蚊 ,后者偏?

二、用RAPD技术分析中国嗜人按蚊种型（论文开题报告）

（1）论文研究背景及目的

此处内容要求：

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例：

本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。

（2）本文研究方法

调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

三、用RAPD技术分析中国嗜人按蚊种型（论文提纲范文）

（1）分子生物学技术在按蚊近缘种鉴定的应用进展（论文提纲范文）

（2）分子生物学技术在蚊虫分类中的应用（论文提纲范文）

（3）蚊分类鉴定研究进展（论文提纲范文）

（4）分子生物学技术在检疫性昆虫鉴定中的应用前景（论文提纲范文）

（5）媒介按蚊遗传标记的研究进展（论文提纲范文）

（6）传疟媒介大劣按蚊和斯氏按蚊基因组DNA遗传多态性研究（论文提纲范文）

（7）辽宁嗜人按蚊和广东嗜人按蚊实验种群的建立及生物学特性观察（论文提纲范文）

（8）广东省嗜人按蚊分布特征、生态习性、传疟作用及蚊媒防制对策的研究（论文提纲范文）

四、用RAPD技术分析中国嗜人按蚊种型（论文参考文献）

• [1]分子生物学技术在按蚊近缘种鉴定的应用进展[J]. 钟敏,蔺应学,王英. 中国热带医学, 2014(12)
• [2]分子生物学技术在蚊虫分类中的应用[J]. 彭淑琼,刘春晓,赵纯中,徐云庆. 中国国境卫生检疫杂志, 2010(03)
• [3]蚊分类鉴定研究进展[J]. 孙立新,吴汉霞,张荣波,丁永健,朱国强,杨庆贵,朱临. 中国国境卫生检疫杂志, 2010(02)
• [4]分子生物学技术在检疫性昆虫鉴定中的应用前景[J]. 王芙蓉,吴薇,荣德福. 安徽农业科学, 2008(08)
• [5]媒介按蚊遗传标记的研究进展[J]. 孙恩涛,张锡林,秦志辉. 中国媒介生物学及控制杂志, 2007(04)
• [6]传疟媒介大劣按蚊和斯氏按蚊基因组DNA遗传多态性研究[D]. 孙恩涛. 安徽理工大学, 2007(07)
• [7]辽宁嗜人按蚊和广东嗜人按蚊实验种群的建立及生物学特性观察[J]. 许国君,康杨,杨文,郁涛,魏红雨. 现代预防医学, 2006(07)
• [8]广东省嗜人按蚊分布特征、生态习性、传疟作用及蚊媒防制对策的研究[D]. 潘波. 第一军医大学, 2006(01)
• [9]中国五种不同地域嗜人按蚊卵及成蚊的观测比较[J]. 康杨,许国君,杨文,郁涛,魏红雨. 中国媒介生物学及控制杂志, 2005(05)
• [10]我国嗜人按蚊偏嗜牛血的研究[J]. 徐保海,许龙善,谢汉国,朱泰华,刘成模,潘波,刘庆生,吴军,谭爱军,王利群,阮峰,李凤华. 中国人兽共患病杂志, 2005(03)

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